实验性变态反应脑脊髓炎模型的建立及mmp-9的表达.pdf

l I IIII III I IIIIIIl }lIIIl Y1 实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立及MMP．9的表达 研究生： 杜 丽 专 业： 内科学 导 师： 曹 霞 教授 中文摘要 目的 1、建立实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型。 中基质金属蛋白酶9(MMP．9)的分布与表达。 3、为EAE、多发性硬化(MS)的治疗提供新的思路。 方法 予EAE组大鼠四肢足垫皮内注射诱导乳剂豚鼠脊髓匀浆一完全福氏佐剂 制备大鼠EAE模型。给予CFA组注射等量的生理盐水和完全福氏佐剂 (NS+CFA)。对两组大鼠分别进行神经功能评分，测量体重变化，并动态观 察EAE组大鼠脑及脊髓组织的病理学变化及MMP．9的表达情况。 结果 要表现为双后肢无力、瘫痪，尾部肌张力减低、消失，大鼠以前肢朝前爬行 时，剑突以下的身体部分着地，双后肢瘫痪，拖拉在后，足跖面朝上，部分大鼠 伴有大小便失禁的情况。发病后3—5天临床表现达到高峰，严重者出现前肢 肌张力降低、四肢瘫痪，处于濒死状态，发病后7天左右EAE症状开始恢复， 明显增高，最高评分为5分。CFA组大鼠均未出现EAE症状，一般情况同正常 动物，活动、饮食正常，体重逐渐增加。 2、病理学变化：光镜下所示，脑、脊髓实质内有大量的炎性细胞浸润， 主要为淋巴细胞，以分布在小血管周围为主，呈典型的“袖套状改变，以 白质和灰白交界处较为明显。KB染色显示发病高峰期脑及脊髓实质内小静脉 周围白质出现大片髓鞘脱失，恢复期可见髓鞘再生现象。Bodian染色显示整 1 个病程中轴索保留相对良好。免疫组化染色显示EAE组大鼠发病早期脑、脊 髓内有大量MMP．9阳性细胞浸润，典型的MMP．9阳性细胞胞浆呈棕褐色，主 要为淋巴细胞、单核细胞，发病14天后阳性细胞表达开始减少，1月后未见 明显的MMP．9表达。电镜下，EAE组大鼠脑、脊髓实质毛细血管内皮细胞线 粒体肿胀，多见管腔狭窄闭锁，出现髓样小体，神经细胞及神经胶质细胞内 内质网及线粒体肿胀，有髓神经纤维轴索内微丝微管稀疏，鞘膜扭曲或层面 分离。对照组未见明显的组织病理学改变。 结论 苗(BPV)诱导Wistar大鼠，可以成功制备EAE模型。 2、EAE组大鼠的病理学改变主要表现为脑脊髓实质内小血管周围大量 的炎性细胞浸润，呈典型的“袖套状改变，可观察到白质脱髓鞘现象，而 轴索保留相对完好，与人类多发性硬化(MS)病理学改变相一致。 3、EAE组大鼠脑脊髓实质内MMP一9表达明显增加，且与病情严重程度 相一致，表明MMP．9在EAE发病机制中起到一定作用。 关键词 实验性变态反应性脑脊髓炎 多发性硬化 Wistar大鼠血脑 屏障 MMP．9炎性因子 2 ESTABLISHMENTOFANIMALMODELFOR EXPERIMENTALAUTOIMMUNE ANDMATRIXMETALLOPROTEINASE一9EXPRESS10N 0N EAERATS Li Postgraduate：Du Medicine Subject：Internal Tutor：Prof．CaoXia ABSTRACT e