氨基酸氧化酶催化合成非天然手性氨基酸研究进展.pdfVIP

　第２９卷 第３期 分　　子　　催　　化 Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．３　 　２０１５年６月 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＭＯＬＥＣＵＬＡＲＣＡＴＡＬＹＳＩＳ（ＣＨＩＮＡ） Ｊｕｎ．　２０１５　 文章编号：１００１３５５５（２０１５）０３０２８８１１ 氨基酸氧化酶催化合成非天然手性氨基酸研究进展 夏仕文，熊文娟，韦燕婵，何从林，徐红梅 （重庆邮电大学 生物信息学院，重庆４０００６５） 关键词：Ｄ氨基酸氧化酶；Ｌ氨基酸氧化酶；动力学拆分；去消旋化；非天然手性氨基酸 中图分类号：Ｑ８１４．１ 文献标志码：Ａ 　　非天然手性氨基酸是已经上市的和正在研发的 ｄａｓｅ，ＬＡＡＯ，ＥＣ１．４．３．２）和Ｄ氨基酸氧化酶（Ｄ 手性药物、手性农药和手性食品添加剂的关键中间 ａｍｉｎｏａｃｉｄｏｘｉｄａｓｅ，ＤＡＡＯ，ＥＣ１．４．３．３）两大类，两 － ［３］ ［１２］ 者均为黄素结合蛋白酶 ．在分子氧存在下，Ｌ 体 ．随着相关产业的发展，非天然手性氨基酸 的市场需求与日俱增．非天然手性氨基酸不能像天 ＡＡＯ和ＤＡＡＯ以严格的立体特异性催化Ｌ或Ｄ氨 然Ｌ氨基酸一样采用发酵法生产，主要制备方法包 基酸氧化脱氢为 亚氨基酸中间体，氧化型黄素腺 α 括化学法和生物法．化学法包括化学不对称合成法 嘌呤二核苷酸（ＦＡＤ）还原为还原型黄素腺嘌呤二 和化学拆分法．化学不对称合成法采用价格昂贵的 核苷酸（ＦＡＤＨ）．ＦＡＤＨ 在分子氧作用下，重新氧 ２ ２ 手性源、手性助剂或手性金属催化剂．化学拆分法 化为ＦＡＤ，分子氧同时还原为过氧化氢． 亚氨基 α 采用手性酸为拆分剂，经历与消旋氨基酸成盐、解 酸中间体进一步自动水解为 酮酸和氨． α 盐、多次重结晶等步骤实现消旋氨基酸的动力学拆 　　ＡＡＯ广泛存在于哺乳动物、藻类、真菌、细 分．无论是化学不对称合成法或是化学拆分法，都 菌、放线菌等物种中．有关ＬＡＡＯ和ＤＡＡＯ的酶学 存在收率低、光学纯度不高、生产成本高、环境污 性质、结构特征、生物学功能以及在生物传感、疾 － ［４８］ 染大等缺点．生物法具有反应条件温和、立体选择 病诊断和治疗中的应用已有全面评述 ．动物源 性高、环境友好等特点［２ｂ，２ｃ］，已成为非天然手性氨 ＡＡＯ由于酶源限制以及自身的生物催化性质缺陷 基酸的主流生产技术．生物法包括生物不对称合成 如窄的底物特异性、差的稳定性和对映选择性，较 法和生物拆分法．生物不对称合成法以较难制备的 少用作有机合成的生物催化剂．微生物源ＡＡＯ不 前手性酮为原料，采用需要辅酶参与的氨基酸脱氢 仅能够利用发酵工程大规模生产，而且能够利用现 酶、转氨酶为合成催化剂，通过不对称还原胺化、 代生物技术如蛋白工程获得比野生酶催化性能更优