10,11,12微生物的代谢解析.ppt

* 2．代谢调节的控制 （1）应用营养缺陷型菌株以解除正常的反馈调节 赖氨酸发酵——（高丝氨酸缺陷型菌株） 在这个代谢工程的设计中，是利用阻断分支途径的高丝氨酸的合成，来解除(Lys+Thr)的反馈调节。即造成高丝氨酸缺陷型(Hser一)，就可解除末端产物对限速酶的反馈抑制。 选育细胞膜缺损突变株  ——油酸缺陷型、甘油缺陷型，或生物素缺陷型 利用油酸缺陷型菌株，限量添加油酸，限制细胞膜磷脂中不饱和脂肪酸的合成而使细胞膜缺损，利于代谢产物渗漏而提高谷氨酸的产量。 生物素缺陷型原理 在脂肪酸生物合成途径中，由乙酰辅酶A羧化成丙二酸单酰辅酶A的反应是一个限速步骤，该反应由乙酰辅酶A羧化酶系催化，包括生物素羧化酶，羧基转移酶和生物素羧基载体蛋白CCP，并且需要生物素作辅酶。选育生物素营养缺陷型菌株，使细胞中的饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的合成受阻，从而影响到磷脂的合成。在培养时限量添加生物素或含生物素的原料，可以控制膜的厚度来调节透性。 （2）应用抗反馈调节的突变株解除反馈调节 抗反馈调节突变菌株，就是指一种对反馈抑制不敏感或对阻遏有抗性的组成型菌株，或兼而有之的菌株。在这类菌株中，因其反馈抑制或阻遏已解除，或是反馈抑制和阻遏已同时解除，所以能分泌大量的末端代谢产物。如Corynebacteriumcrenatum(钝齿棒杆菌)的抗α-氨基-β-羟基戊酸（AHV）菌株能积累积苏氨酸。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * b、细菌型乙醇发酵 (发酵单胞菌和嗜糖假单胞菌) 同型酒精发酵 1 G 2 丙酮酸 代谢速率高，产物转化率高，发酵周期短等。缺点是生长pH较高，较易染杂菌，并且对乙醇的耐受力较酵母菌低. （ED or EMP） 2乙醇 + 1ATP 异型酒精发酵(乳酸菌、肠道菌和一些嗜热细菌） 1 G 2 丙酮酸 （丙酮酸甲酸解酶） 乙醛 ? 乙醇 甲酸 + 乙酰-- CoA 2）乳酸发酵 同型乳酸发酵 （德氏乳杆菌、植物乳杆菌等） —— EMP途径（丙酮酸 乳酸） 异型乳酸发酵 第二节 分解代谢与合成代谢的联系 12种中间代谢物 葡萄糖-1-P 葡萄糖-6-P 二羟丙酮-P 3-P-甘油酸 磷酸烯醇式丙酮酸 丙酮酸 由EMP途径产生 第二节 分解代谢与合成代谢的联系 核糖-5-P 赤藓糖-4-P 由HMP途径产生 乙酰-COA 草酰乙酸 α-酮戊二酸 琥珀酰-COA 由TCA循环产生 一.两用代谢途径 合成细胞物质 分解产能 EMP途径 TCA循环 二. 代谢物回补途径 回补（10条途径） 磷酸烯醇式丙酮酸 草酰乙酸 乙醛酸循环---回补途径之一 乙醛酸 柠檬酸 草酰乙酸 苹果酸 琥珀酸 异柠檬酸 乙酰COA 乙酰COA 第三节微生物独特代谢 一.自养微生物CO2的固定 1、Calvin循环 2、厌氧乙酰-COA 途径 3、逆向TCA循环 4、羟基丙酸途径 卡尔文循环（Calvin cycle）的三个阶段 羧化反应 3个核酮糖-1,5-二磷酸通过核酮糖二磷酸羧化酶将3个CO2固定,并转变成6个3-磷酸甘油酸分子。 还原反应 3-磷酸甘油酸还原成3-磷酸甘油醛（通过逆向EMP途径产生）。 CO2受体的再生 1个3-磷酸甘油醛通过EMP途径的逆转形成葡萄糖，其余5个分子经复杂的反应再生出3个核酮糖-1,5-二磷酸分子。 Calvin cycle 还原性三羧酸循环途径 4C 厌氧乙酰-CoA途径 羟基丙酸途径 Amphibolic pathway 两用代谢途径 EMP、HMP和TCA循环 Anaplerotic sequence 代谢物回补顺序 指能补充两用代谢途径中因合成代谢而消耗 的中间代谢物的那些反应 Glyoxylate cycle 乙醛酸循环 Glyoxylate cycle 乙醛酸循环