发酵食品中氨基甲酸乙酯含量的测定方法气相色谱-安徽省卫生厅.docVIP

附件1 DB34 安徽省地方标准 DBS34/XXXX —2013 食品安全地方标准 发酵食品中氨基甲酸乙酯含量的测定方法 气相色谱-质谱法 2013年XX月XX日发布 2013年XX月XX日实施 安徽省卫生厅 发布 前 言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准的附录A、附录B均为资料性附录。 本标准由安徽省卫生厅提出并归口。 本标准起草单位:阜阳市产品质量监督检验所（安徽省粮油制品及酒类产品检测中心）、 岛津企业管理（中国）有限公司分析中心。 本标准主要起草人：谭波涛、吴荣涛、郝媛媛、赵杰、薛艳、张伟伟、张冬青。 本标准系首次发布。 发酵食品中氨基甲酸乙酯含量的测定方法 气相色谱-质谱法 1 范围 本标准规定了发酵食品中氨基甲酸乙酯（EC）含量的气相色谱-质谱测定方法。 本标准适用于泡菜、酱油、食醋、豆豉、黄酒利用有益微生物加工制0.006mg/kg。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 原理 试样中氨基甲酸乙酯用饱和氯化钠水溶液提取，经硅藻土固相萃取柱净化，气相色谱-质谱仪检测，内标法定量。 4 试剂与材料 除另有说明，所有试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中规定的一级水。 4.1 甲醇：色谱纯。 4.2 正己烷：色谱纯。 4.3 二氯甲烷：色谱纯。 4.4 乙酸乙酯：色谱纯。 4.5 无水硫酸钠：经650 ℃灼烧4 h，置于干燥器内备用。 4.6 氯化钠。 4.7 饱和氯化钠溶液：准确称取36.0g氯化钠溶解于100mL水中，混匀后备用。 4.8 氨基甲酸丁酯标准品：分子式:C5H10NO2，CAS:592-35-8分子式:C3H7NO2 CAS:51-79-60m×0.25mm（内径）×0.5μm（膜厚），或相当者。 色谱柱温度：初温40℃保持1.0min,以10℃/min升温至60℃，再以5℃/min升温至160℃，保持1.0min，最后以10℃/min升温至220℃运行10min。传输线温度：250℃。 进样口温度：220℃。 电离方式：电子轰击电离（EI）。 电离能量：70ev。 离子源温度：230℃。 扫描模式：选择离子扫描；氨基甲酸乙酯定量离子（m/z）））mL、0.8μgEC+0.4μg氨基甲酸丁酯/mL的标准工作溶液，按浓度由低到高的顺序进样检测，以定量离子峰面积-浓度作图，绘制标准工作曲线。标准谱图参见附录A。 气相色谱-质谱检测和确证 根据样液中被测物的含量情况，选定浓度与样液相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氨基甲酸乙酯的响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。如果样液与标准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，则根据附录B中氨基甲酸乙酯选择离子的种类及其丰度比进行确证。在上述气相色谱-质谱条件下，样品中待测物质保留时间与标准工作溶液中对应的保留时间的偏差在±2.5%，且样品中被测物质的相对离子丰度与浓度相当标准工作液的相对离子丰度进行比较，相对丰度允许相对偏差不超过表1规定的范围，则可确定样品中存在对应的被测物。 表1 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% 50 20～50 10～20 ≤10 允许的相对偏差/% ±10 ±15 ±20 ±50 空白试验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 结果计算 氨基甲酸乙酯与其内标物氨基甲酸丁酯的相对校正因子，按式（1）计算: 式中： R----氨基甲酸乙酯和其内标物氨基甲酸丁酯的相对校正因子； An---氨基甲酸乙酯标样的峰面积（峰高）； A1---内标物氨基甲酸丁酯的峰面积（峰高）； Cn---氨基甲酸乙酯的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； C1---内标物氨基甲酸丁酯的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）。 试样中氨基甲酸乙酯的含量，按式（2）计算，测得结果应扣除空白值： 式中： X ------试样中氨基甲酸乙酯含量，单位为微克每千克（μg/kg）； R ------氨基甲酸乙酯和其内标物氨基甲酸丁酯的相对校正因子； Asn ---实际样品中氨基甲酸乙酯的峰面积（峰高）； As1 ---实际测定时内标物氨基甲酸丁酯的峰面积（峰高）； ms1 ---实际测定时内标物氨基甲酸丁酯的量，单位为微克（μg）； m -----样品的质量，单位为克（g）。 氨基甲酸乙酯及内标物的标准谱图 氨基甲酸乙酯及其内标物的总离子流图（TIC） 氨基甲酸乙酯的质谱图 （资料性附录）氨基甲酸乙酯、氨基甲酸丁酯的保留时间、定性和定量选择离子 表