β-雌二醇对胃粘膜细胞系GES-1中ER-α蛋白表达影响.docVIP

17β-雌二醇对胃粘膜细胞系GES-1中ER-α蛋白表达的影响 张尚昆 （江汉大学医学院病理学与病理生理学教研室 湖北 武汉 430056） 摘要：观察不同浓度雌二醇处理不同时间的情况下，人正常胃粘膜细胞系GES-1中ER-α蛋白表达量的变化，探讨正常胃粘膜细胞中雌激素对ER-α蛋白表达可能存在的影响．方法：GES-1细胞经5×10-6mol/L、5×10-8mol/L、10-12mol/L和10-14mol/L的17β-雌二醇(17β-estradiol，E2)处理24h，应用Western Blot及灰度分析的方法检测蛋白表达量的改变，平均光密度值采用t检验分析。 关键词：雌激素；ER-α；正常胃黏膜细胞系 胃癌是中国常见恶性肿瘤之一［1］，其男女发病率为2：1。Sipponen等发现女性胃癌发生时间较男性推迟10-15年，绝经期后发病率与男性相近［2］。经典的雌激素受体α（estrogen receptorα，ER-α，又称ER-α66）在胃癌中表达率远较乳腺癌低（2%－28%），长期以来胃癌被认为是非雌激素依赖性肿瘤。近期研究发现，选择性雌激素受体调节剂他莫昔芬（Tamoxifen，TAM）与胃癌的发生有关［2］，雌激素在多种传统意义上的非雌激素依赖肿瘤中发挥重要作用［2］，但是，雌激素对正常胃细胞系是否也有影响的研究尚不清楚。 ER-α36是2005年发现的独立存在的ER-α66的同源异构体。其在乳腺癌中被证明与乳腺癌细胞的生长相关，尤其是在ER-α阴性的乳腺癌中发挥重要作用，并已经发现ER-α36对ER-α66和ER-β具有抑制作用［2］。ER-α36在胃癌中的表达情况和生物学作用未见报道。来自我们的前期研究发现，人胃癌组织中存在ER-α36分子表达（mRNA和蛋白质），并且癌组织中表达量高于癌旁组织及正常组织，胃癌组织及胃癌细胞株中ER-α36的表达高于ER-α66，胃癌ER-α36mRNA表达与胃癌淋巴结转移相关［3］。 1 胃癌 近年来研究发现，胃癌与雌激素以及雌激素受体有关。在胃癌组织中检测出了雌激素受体的存在。王陆佰等［8］采用实时荧光定量 RT-PCR 方法检测了4 株胃癌细胞 AGS、BGC-823 、MKN-45、SGC-7901中ER-α36和 ER-α66mRNA的表达情况；采用半定量 RT-PCR方法检测 20例人胃腺癌组织中肿块、癌旁组织及正常组织中的 ER-α36和 ER-α66mRNA 表达情况。结果显示：ER-α36和 ER-α66的mRNA 在胃癌细胞株和人体胃癌样本中均有表达。胃癌细胞株中ER-α36表达量高于ER-α66；人体样本中ER-α66在正常组织表达量最高，ER-α36在癌组织中表达量最高，且与患者的年龄、肿瘤的大小、组织学分级以及淋巴结转移相关。研究结果显示：ER-α36在胃癌细胞中发挥的作用可能大于ER-α66，ER-α36mRNA 的高表达与胃癌的生物学行为相关。 2 雌激素受体 ER-α的生物学效应 初步研究的结果发现，ER-α36具有细胞因子的作用，在细胞的生长与凋亡中发挥重要作用。传统的雌激素受体ER-α66为核受体，主要分布在细胞核中，属于核受体超家族成员，由配体激活存在于核内的转录因子，行使其生物学效应。通过成骨细胞膜实验验证，与经典的雌激素受体ER-α66不同，ER-α36为膜受体［9］，大量分布于细胞膜的表面，接收来自细胞外和细胞内的信号转导。作为膜受体的ER-α36在生理、病理过程中发挥了与经典 ER-α66不同的生物学效应。一般情况下，它可以介导细胞信号传导通路，在细胞的内外信息交流中发挥重要作用。研究显示，ER-α36既可以被雌激素激活，又可以被抗雌激素激活，通过Caveolin-1 介导的 MAPK 信号通路的激活促进乳腺癌细胞增殖［10］。Caveolin-1 单倍不足可以促进正常乳腺细胞的早期转化［11］，其机制与 ER-α36介导的 PI3 K/AKT 信号通路的激活有关［11］；雌激素受体 ER-α36参与了子宫内膜癌中睾酮诱导的细胞增殖信号通路的调节［12］。此外，雌激素受体ER-α36在肝癌和胃癌信号通路调节中亦发挥着重要的生理学作用。由于这种新型的雌激素受体在机体中各个器官的分布以及调节作用与传统的雌激素受体 ER-α66具有一定的差异性，因此，值得我们更进一步地研究和探讨。 3 ER-α在胃癌细胞中的表达 雌激素(estrogen，E)是一种由内分泌系统产生的类固醇性激素，雌激素与其靶器官乳腺等组织的肿瘤发生密切相关［3］。雌激素通过与雌激素受体(estrogen receptor，ER)的结合，传递细胞生长的信号，对靶器官组织的肿瘤形成产生影响。近年来的研究发现，雌激素及雌激素介导的信号转导通路在非雌激素依赖的肿瘤如肺癌、膀胱