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第四章 生物制品生产的 基本技术 第二节、生物制品的灭活剂与保护剂 一、灭活与灭活剂Inactivation and Inactivator 凡破坏微生物的生物学活性及血清中补体活性，或破坏病原微生物的繁殖能力和致病作用，均称之为“灭活”。 适当的灭活剂和灭活方法，对微生物抗原性及免疫原性没有影响。 研究灭活生物制品，重要条件是选择适当的灭活剂和灭活方法。 一、灭活与灭活剂 （一）、物理学方法灭活 一般常用加热杀菌、超声波裂解细胞、射线照射杀死微生物体或消除其毒性。 采用此类灭活方法应注意，加热处理以放水浴间接升温为好；超声波裂解应放冰浴中间断进行；60Co照射处理，应根据被照射物的容量大小选择照射物与钴源的距离和剂量。 * * * * 第一节 菌(毒、虫)种的选育培养与保藏 一、生物制品菌(毒、虫)种的分类 生物制品中使用的菌(毒、虫)种的范围很广泛，包括生产和检定疫苗、毒素、类毒素、抗血清以及诊断用品等的菌(毒、虫)种，并随着生物制品种类的增多和生物制品技术的发展，菌(毒、虫)种的内容也会不断增加。 （一）、按菌(毒、虫)种的毒力分类 1、强毒菌(毒、虫)种 是指具有强大致病力的菌(毒、虫)种，一般免疫原性也良好，常用于制造某些灭活疫苗，抗血清以及疫苗效力检验。 2、弱毒菌(毒、虫)种 是指对动物无致病力而具有一定免疫原性的菌(毒、虫)种，主要用于制造弱毒活苗。 （二）、按菌(毒、虫)种的用途分类 1、生产用菌(毒、虫)种 是指用于生产生物制品的菌(毒、虫)种，即指生产疫苗、抗毒素、类毒素、抗血清及诊断用品的菌、毒种。 如生产猪瘟兔化弱毒疫苗用的猪瘟种毒，生产破伤风类毒素的破伤风菌种，生产炭疽抗血清的Ⅱ号炭疽杆菌C40～22菌种，制造牛型结核菌素的牛型结核杆菌菌种等． 2、检定用菌(毒、虫）种 是指用于检定生物制品效力等菌(毒、虫)种。如效力检验中攻毒用的新城疫强毒，猪丹毒强毒菌种等。另外，还包括用于检定诊断血清交叉反应的菌（毒、虫）种。 3、工具用菌（毒、虫）种 是指在生物制品生产中作为工具使用的菌（毒、虫）种。如基因工程中表达某些异种抗原用的宿主大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌等。 （二）、按菌(毒、虫)种的用途分类 （一）、具有良好的免疫原性 由于生物制品主要是免疫制剂，故耍求菌(毒、虫)种应具有良好的免疫原性，使用后能产生坚强的体液免疫和细胞免疫，并持续较长时间，同时对某些菌(毒，虫)种而言还应是抗原谱广。 一般来说，动物接种后产生80％以上的保护即为有良好的免疫原性。因为机体的免疫反应是一个生物学过程，受到遗传、环境等许多因素的影响，不论使用菌(毒、虫)种的免疫原性多么好，都不可能一次使免疫动物获得100％的保护。 生物诊断用品的菌(毒、虫)种应以少量注入动物体内就能产生强烈免疫反应，这样才能生产出既特异又灵敏的诊断用品。 二、生物制品中菌(毒、虫)种的条件 （二）、具有可靠的安全性 生物制品使用的菌(毒、虫)种除具有良好的免疫原性外还应安全。菌(毒、虫）种的安全性主要与两方面的因素有关，一方面是菌(毒、虫)种本身的残余毒力；另一方面是混有强毒或其他病原体。 残余毒力是指减毒后的弱毒菌(毒、虫)种仍残存一定的毒力或致病力。如鸡新城疫Ⅰ系弱毒疫苗种毒就保持较强的毒力，对雏鸡接种后有致病性，而2个月龄以上的鸡接种才安全。 在菌(毒、虫)种的选育培养时，尽量降低毒力，保持良好的抗原性，使动物接种后既能产生良好的免疫，又不致于引起发病或损伤。 而在实践中，一般免疫原性与毒力呈正相关，免疫原性强毒力也强。如果采用某种方法使毒力降低，免疫原性也随之降低。用于生产灭活疫苗的强毒都有很好免疫原性，而用于生产活疫苗的弱毒，免疫原性都有一定程度下降。这是选育培养菌(毒、虫)种时需要注意和解决的一个矛盾，从某种意义上讲安全更为重要。 （二）、具有可靠的安全性 在菌(毒、虫)种的选育培养过程中还要避免污染强毒和其他病原体，尤其是用于活疫苗生产的菌(毒、虫)种。 因为在生产活疫苗时，不加任何灭活剂，使污染的强毒和病原体得不到应有的处理。 对于毒种来说，控制污染外源病原体是较难的。因为用于病毒培养的细胞、鸡胚及动物不易做到完全无污染。 （二）、具有可靠的安全性 （三）、具有典型的生物学性状 选育培养的菌(毒、虫)种要有典型的生物学性状，如形态、染色、培养特性、生化特性、抗原结构、致病性、宿主适应范围、代谢产物、色素产生以及抵抗力等。 这些生物学性状是鉴别菌(毒、虫)种的重要标志，可用以区分其他微生物，进而在生产和检定生物制品时依据这些性状来控制质量。 如果发现某些性状改变就标志着菌(毒、虫)种发生了变异或发生外源污染，应及时废弃或更换，如果是用弱毒或无毒菌(毒、虫)种生产生物制品，这些性状也是区别强毒株的标志，从而保