生化实验分析.docVIP

果蔬成分生化分析1、掌握微量测定维生素C的方法和技术。2、了解果蔬中维生素C含量。 掌握总糖和还原糖含量的测定方法。 了解聚丙烯酰胺凝胶的制作过程及结构特点。 还原型维生素C可被氧化型2，6-二氯酚靛酚（下面简称染料）所氧化，成为氧化型维生素C。氧化型染料在中性或碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。成为还原型后为无色。用氧化型染料来滴定还原型维生素C，当滴至全部还原型维生素C被氧化后，在稍滴一点呈微红色为终点。滴定用去染料量与样品中还原型维生素C量成正比。此法虽简单迅速，但氧化型染料亦能使其他还原型物质氧化，所以有一定缺点。620nm处有最大吸收。多糖为非还原糖，可用酸将没有还原性的多糖和寡糖彻底水解成具有还原性的单糖，再利用还原糖的性质进行测定，这样就可分别求出总糖和还原糖的含量。 用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离鉴定蛋白质，主要依赖于电荷效应和分子筛效应。再与标准样品对照即可确定各区带的成分。 1%草酸溶液2%草酸溶液维生素C标准液氧化型0.1% 2，6-二氯酚靛酚溶液各种果蔬蒽酮试剂标准葡萄糖溶液（0.1mg/mL6mol/L HCl溶液20% NaOH溶液操作1、制备新鲜果蔬液：如洗净新鲜橘子，擦干表面水分，剥去外皮，称20.0g橘子放入50mL量筒中，加2%草酸液至40mL刻度处（即稀释1倍）。用玻璃棒搅拌，静置10分钟，过滤，滤液即是染料。 2、染料液装入滴定管中：应驱除滴