Chapter3_酶的提取与分离纯化(上)分析报告.pptVIP

等密度梯度离心（沉降平衡离心） 根据颗粒的密度不同而进行分离。 当欲分离的不同颗粒密度范围在离心介质密度范围内时，在离心力场下，不同浮力密度的颗粒或下沉，或上浮，只要时间足够长，就可以一直移动到与其密度恰好相等的位置（等密度点），形成区带。 离心方法的选用 常用的介 质：氯化铯、硫酸铯、溴化铯等。 特点： (1) 介质的密度梯度范围包括所有待分离物质的密度； (2) 适于分离沉降系数相近，但密度不同的物质。 离心方法对比 差速离心： 属于动力学方法，关键在于选择适合于各分离物的离心力。 等密度梯度离心： 测定颗粒浮力密度的静力学方法，关键在选择氯化铯浓度，使之包括待分离物的密度范围 密度梯度离心： 兼有以上两种方法的特点，关键在于制备优质的密度梯度溶液。 共同点： 都是预先将介质铺成梯度。 差异： 所依赖的基础、离心时间、转速及颗粒与周围介质的密度是否相等诸方面是有一定差别。 速率区带离心和等密度区带离心 速度区带离心法 等密度离心法 沉降速度主要依赖颗粒形状和大小 沉降平衡主要依赖颗粒密度，与形状和大小无关 离心时间较短，待大颗粒到达管底前停止离心。 颗粒沉降速度不为零，若延长离心时间，颗粒会沉管底。 离心时间与液柱长短有关（一般16～18小时）。 每种颗粒的沉降速度均为零，延长离心时间也不再下沉。 转速较高（50,000rpm) 转速较低(50,000rpm) 颗