-诱变剂的微核测试教案分析.pptVIP

湖州师范学院 生命科学学院生物系 一、实验目的 1、了解细胞微核形成的机理及其形态特点， 2、学习植物根尖细胞的微核检测技术。 二、实验原理 ※ 微核(micronuclei)简称MCN，是真核类生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。 ※微核形成:有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片不能向两极移动，游离于细胞质中，在间期细胞核形成时，在核产生一到几个很小的圆形结构—微核，直径大约是细胞直径的1/20～1/5。 三、实验材料 大蒜或蚕豆 五、实验步骤 1、幼根的培养 （1）大蒜：提前 3—5d进行培养，将大蒜瓣剥去外边膜质枯皮，下端可见许多微微凸起的根原体，将蒜瓣架在烧杯（大小与蒜瓣适宜）口上，杯中盛满清水，使蒜瓣的下部浸入水中，置培养箱中，注意每天换水，经3—5d后，即可长出1-2cm的嫩根。 （2）蚕豆：浸种24h，期间换水2次，25℃催芽，36-48h生根1-2cm。 五、实验步骤 2、处理根尖：阳性检测采用0.1%秋水仙素[0.1g/L硫酸铜（大蒜）、0.5g/L重铬酸钾（蚕豆）]，对照用自来水处理，处理时间24h，处理液浸没根尖。 3、恢复培养：处理后的根尖用自来水浸洗3次，每次2-3min，洗净后在水中恢复