蛋白质的分离纯化和分析鉴定.docVIP

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  • 2016-04-15 发布于安徽
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蛋白质的分离纯化和分析鉴定.doc

蛋白质的分离纯化与分析鉴定 摘要:蛋白质的分离纯化方法是生命科学领域关注的热点。根据蛋白质的酸碱性质、分子大小与形状、溶解性质及其与配体亲和性等,对其分离纯化和分析鉴定方法进行了综述。分离纯化某一特定蛋白质的一般方法包括前处理、粗分级分、细分级分离和纯度鉴定四步,本文重点介绍讨论了步骤三中的几种主要方法。 关键词:蛋白质,分离,纯化,鉴定 一、引言 生物体内的大部分生命活动如催化代谢反应、物质运转、运动的相互协调、兴奋的传导、生长与发育等,均是在蛋白质的参与下完成的。因此,研究蛋白质对了解生命规律、指导工业生产、医药实践有着重大意义,而蛋白质的分离纯化是蛋白质研究中必不可少的一个环节。必须要了解目的蛋白的分子量、等电点、溶解性及稳定性等基本性质才能制定出合理的分离纯化方法。由于不同的蛋白质结构和性质不同,分离方法也不同例如根据分子大小可使用差速离心、分子筛、超滤或透析等分离技术;根据溶解度大小的不同,使用盐析、溶剂抽提、分配层析、结晶等方法分离;根据所带电荷的不同,可采用电泳、等电点沉淀、离子交换层析等方法;根据结合亲和性,可用新和层析进行分离。蛋白质的分离纯化技术种类是很多的而且发展很快某些技术如以前不多见的超滤分离方法,目前在国内应用已相当普遍,除此之外广泛使用的层析、电泳方面也不断出现新的技术和方法。如层析方面,高压液相色谱是一种具有快速和分辨力的柱层析技术。 二、正文 分离

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