外源化学物致癌作用要点分析.ppt

全国恶性肿瘤发病率及构成 肝癌，很多可能是因为水； 肺癌是因为我们的空 气 ； 胃癌，是因为我们的食物。 化学致癌过程 三、细胞程序性死亡与致癌过程  四、DNA修复与致癌过程 五、癌基因、原癌基因及抑癌基因 中国因食管癌死亡的占全部因癌死亡的23.5% ，河南省林县人口的20%死于食管癌。 调查结果： 林县人都喜欢吃腌菜； 农民挖池塘蓄积雨水来饮用； 新鲜水果和蔬菜摄入很少； 当地居民喜欢吃很烫的食物。 1.品系：在选择品系时应选择较敏感、自发肿瘤率低、生命力强及寿命较长的品系。美国国立癌症研究所（NCI）推荐 Fischer344大鼠和B6C3F1小鼠。 2.年龄：一般选用刚离乳的动物，以保证有足够长的染毒和发生癌症时间，而且幼年动物解毒酶及免疫系统尚未完善，对致癌作用比较敏感。 3.性别：为接近人类情况，应使用同等数量的雌雄两种性别的动物。 4.数量：动物数应满足统计学分析的要求。各组动物需求数与实验动物肿瘤自发率及受试物诱发动物肿瘤发生率有关。一般每组至少有雌雄各50只动物，希望在出现第一个肿瘤时，每组存活动物数不少于25只。 2、剂量设计 为在有限数量的动物能检出致癌物，高剂量组应 尽可能大，原则上，可引起轻微的毒性反应，但不 影响其正常生长、发育和寿命。美国癌症研究所 （NCI）推荐以最大耐受剂量（MTD）为高剂量。最 大耐受剂量是由90天毒性试验来确定的，此剂量应 使动物体重减轻不超过对照组的10%，并且不引起死 亡及导致寿命缩短的中毒症状或病理损伤。 3、染毒方式 途径：经胃肠道、皮肤、呼吸道、注射等途径染毒，前提是尽量按人类实际接触情况选用适宜的染毒途径。 4、试验期限 原则上试验期限要求长期或终生，应包括动物正常寿命的大部分时间： 一般小鼠和仓鼠至少18个月，大鼠至少24个月。 试验期中，当最低剂量组或对照组存活的动物数仅为开始时的25%时，可及时中止试验；但因明显的受试物毒作用造成高剂量组动物过早死亡，则应继续进行试验。 5、观察指标 一般观察 每天观察实验动物的一般状况（外表、活动、 摄食情况等）和毒性反应，对死亡动物要及时剖 检。试验最初三个月每周称体重一次，以后每四周 称体重一次。掺入饲料或饮水中染毒时，应记录食 物消耗量或饮水量。 肿瘤发生情况 对每一肉眼可见及可触及的肿瘤，均应记录其 出现时间、部位、大小、外形、发展状况和动物死 亡时间。 病理检查 试验过程中死亡或濒死而提前处死动物，及试 验结束后的全部处死动物均应进行系统尸检和组织 病理学检查，确定肿瘤的性质和靶器官。 6、结果分析 肿瘤的发生率： 肿瘤的发生率= ×100% 肿瘤多发性 是指一个动物出现多个器官的肿瘤或一个器官 出现多个肿瘤，是化学致癌的显著特征。 一般计算 每一组的平均肿瘤数和每一组中出现2个、3个或多 个肿瘤的动物数或比例。 当染毒组与对照组存在差异，并有剂量-多发性 关系，则认为是阳性。 肿瘤潜伏期 即从摄入受试物起到发现肿瘤的时间，可将 各组第一个动物出现肿瘤的时间作为该组的潜伏 期。但内脏肿瘤不易觉察，通常将肿瘤引起动物 死亡的时间定为发生肿瘤的时间。 致癌指数＝肿瘤发生率（％）/ 潜伏期（天）×100% 当潜伏期缩短，且存在剂量-潜伏期关系时，也 视为阳性。 阴性结果的确定 世界卫生组织（WHO，1969年）提出下列4条判 断标准，阳性结果的判断需满足下列反应的一种或 数种： 阴性对照组动物出现的一种或数种肿瘤，试验组 动物均有发生，且肿瘤发生率高于对照组； 试验组动物发生阴性对照组没有的肿瘤类型； 试验组动物肿瘤发生早于阴性对照组； 试验组每个动物的平均肿瘤数超过阴性对照组。 人类流行病学调查 它是确定人类致癌物惟一手段。 正确修复：受损的DNA完全回复到原有的结构与功能，不发生突变。 错误修复：经修复的DNA部分仍可能在结构和功能上存在缺陷，细胞虽能生存，但出现突变。 DNA损伤-----修复-----突变-----肿瘤 化学致癌物能否引发肿瘤既取决于它们对机体生物大分子尤其是DNA的损伤，也取决于机体 对损伤DNA的修复能力。 癌基因（oncogene）：一类在自然或实验条件下能引起细胞恶性转化及癌变的基因。 癌基因是化学致癌物作用的靶分子 在细胞癌变过程中发挥关健作用 指导合成的蛋白质能促成细胞恶性表型的形成 原癌基因（proto-on