第七章细菌和病毒的遗传解读.ppt

浙 江 大 学 遗传学第八章 第七章 细菌和病毒的遗传 第一节 细菌和病毒遗传　　研究的意义 第二节 噬菌体的遗传分析 第三节 细菌的遗传分析 (三)、共转化与遗传图谱绘制 利用共同转化绘制细菌连锁遗传图谱的基本原理： 相邻基因发生共同转化的概率与两者的距离间成正向关系，基因间距离越近，发生共同转化的频率越高，反之越低。 因此可能通过测定两基因共同转化的频率来指示基因间的相对距离。 转化与遗传图谱 按照概率定律，两个片段同时转化的概率应为它们单独转化的概率的乘积，所以这种情况的概率是很低的。 当两个基因紧密连锁时，它们就有较多的机会包括在同一个DNA片段中，并同时整合到受体染色体中。因此，紧密连锁的基因可以通过转化进行作图。 ◆几种可能解释及其分析 对上述试验结果原养型菌落可能产生于： 亲本细菌A或B发生了回复突变； 两品系细胞通过培养基交换养料——互养作用； 两品系间发生了转化作用； 为了验证这些原养型菌落产生的可能而进行的研究最终表明：这些解释均不成立。 ◆回复突变可能的排除 Lederbery和Tatum利用的双营养缺陷型菌株进行试验，已基本排除A或B品系发生回复突变产生原养型细菌的可能。 单基因回复突变的频率约为10-6； 双基因回复突变的频率则为10-12，频率很低。 但试验中产生原养型菌落产生的频率非常高，因此基本可以排除回复突变的可能。 ◆互养作用及其排除 试验材料： A品系：A-B+ T1S(met-bio-thr+leu+T1S)； B品系：A+B- T1R(met+bio+thr-leu-T1R)。 试验方法： 将A、B品系混合接种在基本培养基表面； 短时间后喷T1杀死A品系，使其不能持续产生thr与leu供B品系持续生长。 结果与结论： 仍然出现原养型菌落。 从而表明互养并非原养型菌落出现的原因，而可能发生了遗传重组。 ◆转化作用及其排除 把品系A的培养液经加热灭菌，加入到B品系的培养物中，未得到原养型菌落；表明原养型菌落可能不是由转化作用产生。 转化的条件：细菌活跃摄取外源DNA分子； 　　　　　　具备重组程序所必需的酶。 转化三种细菌：肺炎双球菌； 枯草杆菌； 流感嗜血杆菌。 转化的两个例子： ①.　用两个带有不同抗性的肺炎双球菌群体混合　?　可以 　　发现带有双抗性的细菌。 　　细菌裂解　　　DNA残留　　　其它细菌摄取转化。 ②.　枯草杆菌活细胞表面分泌DNA，可被其它细胞摄取。 ㈠、供体与受体的互作： ①.　转化片断的大小： 　　肺炎双球菌转化：DNA片断至少有800bp； 　　枯草杆菌的转化：DNA片断至少有16000bp。 ②.　供体DNA分子存在的数目： 　　供体DNA分子数目与特定基因的成功转化有关。 　　链霉素抗性基因转化：每个细胞含有10个DNA分子之前， 　　　　　　　　　　　　　　抗性转化体数目一直与DNA分子 　　　　　　　　　　　　存在数目成正比。 　　原因：细菌的细胞壁或细胞膜上有固定数量的DNA接受 　　　　　　座位，故一般细菌摄取的DNA分子数10个。 ③．受体的生理状态： 　　感受态是处于刚停止DNA合成、而蛋白质合成继续活跃 进行时的状态。 　　活跃合成的蛋白质可使细菌细胞壁易于接受转化DNA。 　　只有感受态受体细胞才能摄取并转化外源DNA，而这种 感受态也只能发生在细菌生长周期的某一时间范围内。 ㈡、转化DNA的摄取和整合过程： 　①.　结合与穿入： 　　DNA分子结合在接受座位上(可逆)， 可被DNA酶降解；接受座位饱和性。 　　DNA摄取(不可逆)，不受DNA酶破坏。 　　穿入后，由外切酶或DNA移位酶降解 其中一条链。 　②.　联会： 　　按各个位点与其相应的受体DNA片段 联会。亲缘关系越远，联会越小、转化的 可能性越小。 ③．整合(重组)： 　　是指单链的转化DNA与 受体DNA对应位点的置换? 稳定地进入到受体DNA。 　　对同源DNA具有特异性。 异源DNA，视亲缘关系远近 也可发生不同频率整合。 黎德伯格等用枯草杆菌进行转化和重组试验： 　　DNA 片段进入受体细胞后，可与受体染色体发生重组。 紧密连锁的两个基因有较多的机会在同一个DNA片段中? 同时整合到受体染色体中。 　　三者并发转化的频率高，故这3个基因是连锁的， 其中his2和tyr1连锁最为紧密： trp2 his2 tyr1 34 13 40 　　单交换时，染色体开环易降解，故不存在单交换类型； 只有双交换和偶数的多交换才有效。 二、接合（conjugation）： 1.　概念：是指原核生物的遗传物质从供体（donor）转移 　　　　到受体（receptor）内的