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五、枸杞多糖的分子结构研究 多糖的结构是其生物活性的基础,认识和了解多糖的结构有助于更好的利用和开发多糖。多糖的存在方式,有些是以单纯碳水化合物的结构形态存在,有些以共价键与脂类、肽类或蛋白质结合。 枸杞多糖结构测定的常用方法 常见的 检测方法 化学方法 物理方法 苯酚-硫酸法,高碘酸氧化, Smith降解,甲基化分析 紫外光谱法、毛细管电泳技术 红外光谱仪、液相色谱仪、 气相色谱仪、质谱、核磁共振 气质联用、 与蛋白质、核酸等生物大分子相似,多糖的结构也可分为一级、二级、三级和四级结构。多糖的一级结构是指多糖的单糖残基组成、相邻糖基之间糖苷键的连接方式、糖链的分支情况以及异头物的构型等。多糖的二级结构是指由存在于多糖骨架各链之间的氢键作用所形成的各种聚合体,在二级结构的基础上,通过进一步盘绕形成的空间构象,它排列有序且规则,即多糖的三级结构。多糖的四级结构是指多聚链之间以非共价键作用力而形成的复杂结构. 枸杞多糖相对分子量的检测方法 蒸汽压法 凝胶过滤法 HPLC 渗透压法 光散射法 粘度法 a f e b c d 相对 分子量 LBP-Ⅰ,LBP-Ⅱ,LBP-Ⅲ,LBPⅣ 相对分子量均大于20000 1 LBPA3,LBPB1,LBPC2,LBPC4分子量分别 为66000,18000,12000,10000 2 Duan 分离得到了4 个均一枸杞多糖,其 分子量在82~115 kDa 之间 3 黄等分离得到三类LbGP,其分子量分别为 925000,2148000,237000 4 王建华通过SDS-不连续体系凝胶电泳法 测得LBP2a分子量为77482 5 王建华等用凝胶柱层析法和SDS-凝胶电泳法研究表明所得各亚级分为分子量均一体,经检索5个亚级分为新的枸杞多糖缀合物。 枸杞多糖 分子量 中性糖含量 半乳糖醛酸所占比例 蛋白质含量 LBP1a 32399 89.6 6.4 3.1 LBP2a 77482 69.3 23.8 5.3 LBP3a 38385 56.2 35.4 4.8 LBP4a 34841 38.6 55.0 3.4 LBP4b 13224 41.3 54.1 2.8 表1 5个亚级组分的特性 枸杞多糖中单糖的组成及其摩尔比 名称 单糖组成 摩尔比 LBP-6 Ara:Rha:Xyl:Man:Gal:Glc 4.83:0.17:0.23:019:1:1 LBP-Ⅰ Ara:Rha:Xyl:Man:Gal:Glc 1:3.15:0.48:0.84:5.17:4.13 LBP-Ⅱ Ara:Rha:Xyl:Man:Gal:Glc 1:3.57:0.02:0.22:1.53:1.03 LBP-Ⅲ Ara:Rha:Xyl:Man:Gal:Glc 2.43:4.22:0.95:0.38:0.38:1 LBP-Ⅳ Ara:Rha:Xyl:Man:Gal:Glc 2.53:3.57:1.33:0.29:1:0.86 蛋白多糖G Ara:Rha:Xyl:Man:Gal:Glc 2.8:0.2:0.08:0.2:2.6:1.0 LBP-V Ara:Gal:Glc 2.5:1.0:10 LBNP Ara:Xyl:Man:Gal:Glc 1.0:10.0:1.0:6.7:4.0 LBPC2 Xyl:Rha:Man 8.8:2.3:1 LBPC4 Glc 赵春久等鉴定了四个具有抗脂质过氧化活性多糖均一体,四者都为肽多糖: (1)LBPA3分子量6.6×l04,[α]=+40°,为β-(1→4)(1→6)连结的阿拉伯糖:半乳糖(1.2:1)组成的杂多糖,肽含量5.2%,有17种氨基酸; (2)LBPB2分子量1.8×104,[α]=+1.9°,为β-(1→4)(1→6)相连的阿拉伯糖:葡萄糖(1:3.1)组成的杂多糖肽,肽含量4.9%,有11种氨基酸; (3)LBPC2分子量1.2×104,[a]=0,为β-(1→4)(1→6)苷键连结的木糖:鼠李糖:甘露糖(8.8:2.3:1)组成的杂多糖肽,肽含量7.2%,有11种氨基酸; (4)LBPC4分子量1.0×104,[α]=+4.8,含量5.0%,有14种氨基酸,糖链是α-(1→4)(1→6)葡聚糖。 枸杞多糖常见官能团红外光谱解析 六、展望 枸杞是我国重要的药用植物资源,枸杞多糖作为枸杞子中重要的生物活性成分,已被现代医学研究证实具有抗衰老、抗疲劳、降血糖、抗肿瘤、降血脂等多种功能,因此,在临床应用及保健类食品开发等方面具有广阔的发展前景。目前, 关于枸杞多糖的分离纯化及分子结构等方面开展了深入的研究, 取得了大量有益成果,为枸杞多糖的进一步研究和利用奠定了基础。然而,研究工作中仍然存在着
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