淀粉酶、ALP.ppt

实验119 碘-淀粉比色法测定淀粉酶 董雷鸣 一、概述 （一）淀粉酶的分类 (一)原理 (二)试剂 淀粉溶液（0.4g/L） 碘应用液 (三)操作 (四)单位定义 100ml血清中的淀粉酶，在37℃, 15min水解淀粉5mg为1个单位。 (五)计算 空白管吸光度－测定管吸光度 100 15 0.4×0.5 × × × 空白管吸光度 0.01 15 5 (六)参考值 血清 80-180U 尿液 100-1200U (七)临床意义 升高 ——急性胰腺炎、流行性腮腺炎； ——急性胆囊炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后。 降低 ——肝炎、肝硬化、肝癌； ——肾功能障碍。 (八)注意事项 草酸盐、枸橼酸盐、EDTA-Na2及氟化钠对淀粉酶有抑制作用，肝素无抑制作用。 唾液含高浓度淀粉酶，须防止带入。 缓冲淀粉溶液若出现浑浊或絮状物，应重新配制。 实验115 比色法测定血清碱性磷酸酶 董雷鸣 一、概述 (一)原理 (二)试剂 碳酸盐缓冲液(pH 10) 磷酸苯二钠底物溶液 铁氰化钾溶液 酚标准应用液 酚标准应用液 (三)操作(Beckman CX7全自动生化分析系统) Beckman CX7的规格 检测量 900个检验结果/小时 检测项目及种类（共33项） 电解质、急诊项目、普通生化、特殊生化、免疫、蛋白、药物检测、毒品检测 检测样品种类 血清、血浆、尿液、脑脊液 (四)单位定义 100ml血清在37℃与底物作用15min,产生1mg酚为1个金氏单位。 (五)参考值 成人 3-13金氏单位 儿童 5-28金氏单位 (六)临床意义 血清ALP活力测定常为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。 (七)注意事项 底物溶液中不应有游离酚，如有酚则空白管显红色，说明磷酸苯二钠开始分解，应弃去不用。 铁氰化钾溶液应避光保存，出现蓝绿色应废弃。 加入铁氰化钾溶液后必须立即混匀，否则显色不完全。 * α-淀粉酶（人体） β-淀粉酶（植物、微生物） （二）含淀粉酶的人体组织 胰腺 唾液腺（腮腺） 胃、胆囊、输卵管、子宫、脾、空肠、回肠、骨骼肌等 （三）淀粉的分类 直链淀粉（糖淀粉） 支链淀粉（胶淀粉） 直链淀粉(糖淀粉)的结构 碘－淀粉包合物结构 支链淀粉(胶淀粉)的结构 α-1，4糖苷键 β-1，6糖苷键 α-1，4糖苷键 连接键 80-90% 1000000 -6000000 250-500个 支链 10-20% 150000 -600000 50-250个 直链 自然界中 的比例 分子量 葡萄糖单位 二、实验 α-淀粉酶 淀粉 葡萄糖 + 麦芽糖 + 糊精 + 碘液 兰色包合物 3.0 3.1 蒸馏水 0.5 0.5 碘应用液 混匀，置37℃水浴准确15min 0.1 — 稀释血清 0.5 0.5 缓冲淀粉溶液(37℃预温) 测定管 空白管 加入物 混匀，蒸馏水调零，波长660nm，比色。 淀粉酶（U） = ※100ml血清中的淀粉酶，在37℃,15min水解淀粉5mg为1个单位。 （ ） 400 = （ml） （min） （mg） 急性胰腺炎时血、尿淀粉酶升高的不同表现 5-7d 12-24h 高峰时间 1-2w 12-24h 尿液 2-5d 8-12h 血清 恢复时间 开始升高时间 含碱性磷酸酶酶的人体组织 骨骼 肝脏 肠黏膜细胞 胎盘等 二、实验 碱性磷酸酶 磷酸苯二钠 磷酸 + 酚 + 4-氨基氨替比林 铁氰化钾 醌类化合物 活性升高 ——骨paget病、恶性肿瘤骨转移或肝转移、佝偻病、骨软化、骨折愈合期、成骨细胞瘤； ——胆道梗阻、甲旁亢等。 活性降低（少见） ——呆小病、磷酸酶过少症、维生素C缺乏症等。 *