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茨维特实验（动画m4-1-1.swf） 样品 载液 2.1.3 色谱分类方法： A. 按固定相外形分： 柱色谱（填充柱、空心柱）、平板色谱（薄层色谱和纸色谱） 。 B. 按组份在固定相上的分离机理分： 吸附色谱(adsorption chromatography): 不同组份在固定相的吸附作用不同； 分配色谱(partition chromatography)： 不同组份在固定相上的溶解能力不同； 离子交换色谱(ion-exchange)： 不同组份在固定相（离子交换剂）上的亲和力不同； 凝胶色谱（尺寸排阻色谱 gel chromatograhy）： 不同尺寸分子在固定相上的渗透作用。 2）峰高： 色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以（h）表示。 3) 色谱峰面积(peak area) 色谱峰面积就是色谱曲线与基线间所包围的面积，即图中CBD内的面积。 4) 色谱峰区域宽度(peak width) 注意： r2,1只与柱温和固定相性质有关，而与柱内径、柱长L、填充情况及流动相流速无关。具体做法：固定一个色谱峰为标准s，然后再求其它峰 i 对标准峰的相对保留值，此时以? 表示： ? 1, 又称选择因子(Selectivity factor)。 tR=t0(1＋k)→推导过程见下： 若流动相（载气）在柱内的线速度为u，即一定时间里载气在柱中流动的距离（单位cm·s-1)，由于固定相的作用（保留），所以组分在柱内的线速度us将小于u，则两速度之比称为滞留因子（retardation factor）Rs. 塔板理论的局限性 (1) 蒸馏塔不完全符合色谱柱内情况（假设理想）； (2) 不是跳跃式脉冲而是连续的； (3) 在一个塔板高度内，也达不到瞬时平衡，需要一定时间传递； (4) 不能找出影响塔板高度的内在因素； (5）峰形为什么会扩张？ 讨论： ?：固定相颗粒使分子扩散受阻，因此降低扩散程度 分子量大的组分， Dg 随柱温升高？？？，随柱压降低而？？？； 流动相分子量大， u 增加， 对于液相色谱，因Dm 较小，B 项可勿略。 讨论： 分离度、柱效和选择性参数的联系： 作业： P60-P61：3、4、20、21、22 2）分子扩散项(Longitudinal diffusion term, B/u) 也叫纵向扩散相。它是由于浓度梯度引起的。当样品被注入色谱柱时，它呈“塞子”状分布。随着流动相的推进， “塞子”因浓度梯度而向前后自发地扩散，使谱峰展宽。其大小为 B=2?D ? —称为弯曲因子，它表示固定相几何形状对自由分子扩散的阻碍情况； D—组分在流动相中的扩散系数。组份为气体或液体时，分别以Dg或Dm表示； 球状颗粒； 大分子量流动相；适当增加流速； 短柱； 低温。 Dg小，即B小 Dg 小，即 B 小 组份停留时间短，纵向扩散小；（B/u） 传质阻力的存在，使分配不能“瞬间”达至平衡，产生峰形展宽。 a）气液色谱：传质阻力项C包括气相传质阻力系数Cs和液相传质阻力系数Cl。 流动相 固液界面 固定液 组分分子 Cl Cg 3）传质阻力项(Mass-transfer term, Cu) b）液液色谱：传质阻力项C包括流动相传质阻力系数Cm和固定相传质阻力系数Cs。 ?sm ?涡流扩散项A与流速u无关； ?低流速区(u小)，B/u大，分子扩散项占主导， 此时选择分子量大的气体如N2和Ar为载气，可 减小扩散，提高柱效； ? 高流速区(u大)，Cu大，传质阻力项占主导， 此时选择分子量小的气体如H2和He为载气， 可增加扩散系数，提高柱效； ? 曲线的最低点对应最佳线速uopt( ) 下的 最小板高Hmin( )； ? LC的Hmin和uopt均比GC的小一个数量级，即在 LC中，较低流速可获得较大的柱效。 4）流速u 由van Deemter方程 H = A + B/u + Cu知道： 当u一定时，仅在A、B、C较小时，H较小，柱效较高；反之则柱效较低，色谱峰将展宽。 以u对H作图，可得H-u曲线（如图），从该曲线得到： 板高，H(cm) Hmin A+B/u+Cu Cmu Csu A B/u § 2.4 分离度及色谱分离方程 2.4.1 分离度(Resolution, R) 分离度是定量描