植物DNA的提取与鉴定.ppt

实验试剂 CTAB提取缓冲液 洗涤缓冲液:(76%乙醇,10mmol/L乙酸铵共100ml:76mL无水乙醇,0.077g乙酸铵,加水到100mL) TE 缓冲液 (10mmol/L Tris-HCL (pH7.4),1mmol/L EDTA ) 氯仿-异戊醇(24 :1) 70% 乙醇 液氮 实验器材 冷冻高速离心机 台式高速离心机 移液器 水浴锅[ 37~100℃ ] 陶瓷研钵 离心管 [ 50ml,有盖 ] 离心管 [ 5ml和1.5ml ] 小玻棒 [ 形状为弯成钩状的 ] 天平 ③酶的作用,细胞中普遍存在的核酸酶在细胞壁或膜遭到破坏时被释放出来,它会降解DNA分子。故须用酶的变性剂、抑制剂使之失活。操作过程最好在低温(0℃左右)下进行。 ,2,所有操作均须温和,避免剧烈震荡。 2.氯仿的作用? 克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。 最后用氯仿抽提,去除核酸溶液中的迹量酚。(酚易溶于氯仿中) 3.异戊醇的作用? 减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。 圣诞快乐! 植物DNA的提取与鉴定 第7组 组员:杨曼、杨芳、朱晨 植物DNA的

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