药物的含量测定方法与验证.ppt

基本要求 思考与练习 一、准确度（accuracy）： 测量值与真实值接近的程度 表 示: 回收率 测定方法： 回收试验 加样回收试验 含量测定方法的准确度 1. 原料药：可用已知纯度对照品或供试品进行测定；或与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较 2. 制剂：考察其他组分和辅料对回收率的影响 ①用含已知量被测物的制剂各组分混合物（包括制剂辅料）进行测定，回收率计算同原料药 ②向制剂中加入已知量的被测物进行测定 ③与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较 具体做法： 测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价回收率；用UV和HPLC法时，一般回收率可达98%～102%；容量法可达99.7%～100.3% 二、精密度（precision ）： 定 义: 同一样品多次测量值之间相互接近的程度 表 示：偏差，标准偏差,相对标准偏差 1. 偏差(deviation ,d) d = 测得值-平均值=Xi-X 2. 标准偏差（standard deviation,SD或S） S =[(∑Xi – X)2/(n-1)]1/2 3. 相对标准偏差(relative standard deviation,RSD) RSD=标准偏差/平均值×100%=S/X ×100% 重复性: 同一实验室,同一人多次测定的精密度 中间精密度: 同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度 重现性: 不同实验室，不同人测定的精密度 数据要求 均应报告标准偏差、相对标准偏差和可信限 三、专属性（specificity）: 指在其他成分(如杂质、降解产物、辅料等)可能存 在下，采用的方法能准确测定出被测物的特性 （鉴别、杂质检查、含量测定方法，均应考察其专属性） 1.鉴别反应 应能与其它共存的物质或相似化合物区分，不含被测组分的样品均应呈现负反应 2.含量测定和杂质测定 色谱法和其他分离法，应附代表性的图谱，以说明专属性。 图中注明各组分位置，色谱法中分离度应符合要求。 在能获得杂质的情况下，可加到试样中，考察对结果的干扰。 在杂质和降解物不能获得的情况下，可用以验证方法和药典方法进行对照；也可用对试样加速破坏的方法，比较两种方法。 四、检测限（ limit of detection， LOD) 是指试样中被测物能被检测出的最低浓度或量，是限度检验指标。它无需测定，只要指出高于或低于该规定的浓度或量即可。 1.目视法 用含已知浓度被测物的试样进行分析，目视确定能被可靠地检测出的被测物的最低浓度或量，常用于显色鉴别法，TLC 2.当用GC和HPLC法时，一般以S/N＝2或3时的相应浓度来确定检测限。 五、定量限（ 1imit of quantitation， LOQ) 是指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。 杂质和降解产物进行定量测定时，要求LOQ。 常用信噪比法确定定量限。 一般以S/N=10时相应的浓度进行测定。 六、线性（linearity ） 是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度或量直接呈正比关系的程度。 回归方程的相关系数（r）越接近1，表明线性越好 可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备一系列（至少5份）供试液进行测定，以响应值对浓度作图，建立回归方程，求出r 如UV：制备一个标准系列，浓度点n =5 A=0.3-0.7 建立回归方程C = aA + b r ＞ 0.9999 0.69 150 0.58 125 0.45 100 0.35 75 0.22 50 A C A C 线性的偏离 ……… ﹍﹍﹍ 七、范围 （range） 是指达到一定精密度、准确度和线性、测试方法适用的高低限度或量的区间。 如原料药和制剂含量测定：应为测试浓度的80%～120% 制剂含量均匀度检查：应为测试浓度的70%-～ 130%。 溶出度或释放度中的溶出量测定：应为限度的±20%。 八、耐用性（robustness） 是指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。 典型的变动因素有： 被测溶液的稳定性、样品提取次数、时间等。 HPLC变动因素有： 流动相组成与pH，色谱柱，柱温，流速等。 GC变动因素有：