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* 北京化工大学机电工程学院 陈国华 * 北京化工大学机电工程学院 陈国华 * XXXXXXXXXXXXXXXXX 微型生物反应器 研究报告 汇报人：陈国华 副教授 2013年10月 北京化工大学机电工程学院 生物反应器 微型生物反应器 研究与开发 研究领域及发展情况 研究领域 发展情况 研究意义 孔板式微反应器测定原理 创新点与技术改进 研究计划 当前研究重点 光纤氧传感器的研究与制备 光纤氧传感器与传统氧传感器对比 荧光猝灭的基本理论 荧光试剂的选用及特性介绍 光纤氧传感器测量原理及检测方法 光纤氧传感器的研究与制备 氧传感膜的研究与制备 重要参数的数据处理和智能控制 重要参数的数据处理 pH控制方案的最终确定 重要参数的智能控制算法 微型生物反应器的研究领域及发展情况 1 第一部分 传统技术局限 传统摇瓶而言，具有高通量，温度、转速可控制的特点，但数据不可记录且工艺参数不可控制 对于搅拌式反应器而言，具有工艺参数可控制，数据可记录，但是无法实现高通量(空间、基础设施的限制)的特点 市场需求 根据生物技术的发展需要，希望微型生物反应器廉价、快速、可靠 可以进行多参数、平行在线监测和具有高通量分析功能 微型生物反应器优势 具有温度、pH和溶氧可控制，数据可记录便于分析，以及高通量的特点 能够在受控条件下经济地进行大量的培养实验 1.1 领域背景 孔板式微反应器 微型生物反应器按结构分类 分体式微反应器 微流控芯片 筛选自动化、结果定量化 发酵优化条件筛选 模拟实际生产 基于现有摇瓶或发酵罐原型缩微化 1.2 发展情况 1.3 研究意义 微型生物反应器是一个多学科交叉的综合体，具有温度、pH和溶氧可控、数据可记录便于分析、以及高通量等优点，能够在受控条件下经济地进行大量的培养实验。因此，对于微型生物反应器的研究与设计就显得尤为重要，并且前景广阔。 1.4 孔板式微反应器测定原理 技术创新 1 结构改进 2 空气或油 1.5 创新点与技术改进 光纤氧传感器制备 2013.10 2014.5 2014.8 光纤pH传感器制备 数据处理方案和控制策略制定 嵌入式系统设计 2015.3 结构设计与优化 2015.10 实验、优化和系统改进 2016.10 1.6 研究计划 数据处理方案和控制策略制定 光纤氧传感器制备 1.7 当前研究重点 光纤氧传感器的研究与制备 2 第二部分 2.1 光纤氧传感器与传统氧传感器对比 基于电化学原理的传统氧传感器： 透氧膜容易老化 需依靠电极本身的氧化还原反应来测定氧的浓度 测定过程中消耗氧，测量精度和响应时间都受到扩散系数的严重约束 外形较大，不利于小型化开发 传统氧传感器局限 基于荧光猝灭原理的光纤氧传感器： 具有检测精度高、不受外界电磁场干扰、不耗氧、无需参比电极、使用安全、应用范围广等优点 可用在各种复杂的环境中，在线连续监测溶解氧 光纤氧传感器优势 荧光是指物质吸收紫外光以及波长较短的可见光后发出的波长较长的可见荧光。利用某些物质被光照射后所产生的、能够反映出该物质特性的荧光，以进行对该物质的定性和定量分析，称为荧光分析 荧光物质吸收特定波长的光照射，记入射光的波长为 λex ；电子受激发，从低能态跃迁到高能态，受激电子释放能量，即产生荧光，荧光波长记为λfl 2.2 荧光猝灭的基本理论 激励光λex E2 E3 E1 荧光λfl 图片 2.3 荧光试剂的选用及特性介绍 荧光试剂的选用 及特性介绍 有机金属钌化合物的荧光强度与氧分压存在一一对应的关系，加上它具有激发寿命长，不耗氧以及对氧的响应特异性和自身的稳定性等，使它成为作为氧的敏感物应用于氧传感器中的最佳选择 钌（Ⅱ）— 邻菲啰啉Ru(phen)3cl2 特性 吸收光谱特性和发射光谱特性： 在200-600nm范围内，其吸收光谱存在三个主峰，一个吸收峰位于470nm附近，另外两个位于紫外区 荧光试剂膜的厚度对荧光猝灭的影响： 试剂膜厚度的增大，荧光强度的变化率增加，荧光的改变就越慢 试剂膜的均匀性对荧光效果的影响: 试剂膜要求均匀分布，否则降低了荧光强度，不利于后期测量 2.4 光纤氧传感器测量原理及检测方法 Y型分叉光纤束 测量室 传感头 滞后相移 Φ 检测原理 检测方法 测量荧光强度的衰减情况 1 2 荧光强度 2.5 光纤氧传感器的研究与制备 基本组成 Y型分叉光纤束 测量室 传感头 滞后相移 Φ 传感器探头 氧传感膜 氧传感膜制备的 传统方法 1.溶胶凝胶法 2.多孔塑料光纤法 本方案初定选用方法 1.共价键结合固定化方法 2.6 光纤氧传感膜的研究与制备 重要参数的数据处理和智能控制 3 第三部分 3.1 重要参数的数据处理 初步方案 限幅平均滤波法：相当于“限幅滤波法