PCR技术及运用()祥解.ppt

二、随机扩增多态性 ??随机扩增多态性 DNA（random amplified polymorphic DNA , RAPD） ： 在常规 PCR 扩增中所用的引物一般是序列特异性的，是针对某个基因或 DNA 序列而设计的。其长度一般在 20 个核苷酸左右。随着引物的长度缩短，在基因组 DNA 上出现与之互补配对序列的几率进一步增加，用于 PCR 扩增后产物的数量也随之增加。当引物的长度缩短到一定程度后，单一引物就可以扩增出多个 DNA 产物。根据这一现象，美国杜邦公司的 Willianms 等人于 1990 年设计出一种建立随机扩增多态性 DNA ，即 RAPD 的方法。 RAPD结果图片 三、扩增片段长度多态性 扩增片段长度多态性分析是针对基因组 DNA 的限制性酶切片段进行选择性 PCR 扩增从而建立 DNA 指纹的技术。 其作用原理为：首先将基因组 DNA 以两种限制性内切酶完全切割，之后再将合成的并与这两个限制酶产生的末端相对应的接头 (adapters) 与酶切 DNA 片段的两端连接。然后以含有接头序列和酶切位点序列的引物，对连接产物作 PCR 扩增。最后利用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行 PCR 产物分离，从而产生 DNA 指纹。 AFLP 是针对基因组限制性酶切片段进行 PCR 扩增的技术，因此亦属于以 PCR 反应为基础的分子标记。与 RAPD 相比，结果的重复