ISO15189方法学评估要点.pptVIP

b. 用线性验证品验证： 线性验证品来源：厂商、美国病理学家协会（CAP）、卫生部临床检验中心 分析物的浓度或活性涵盖分析物的可报告范围，6份样本，每份样本测定2次，并计算平均值。（卫生部临床检验中心规定分析物的浓度或活性应涵盖分析物的可报告范围，共5份样本，每份样本测定4次，并计算平均值） 线性1：采用多项式回归分析判断多项式拟合数据时线性还是非线性，当最适多项式为线性拟合模型时，直接判断为线性。 线性2：当非线性多项式拟合数据点比线性好时，先看最适多项式与线性拟合之间的平均线性偏差（ADL）,如果ADL小于方法学允许线性偏差时，可当线性对待。 EP6-A c. EP6-A 实验方法： EP6-A采用了二元一次直线回归、二次与三次的曲线回归统计处理，以统计估计值与实际检测值的差异（统计误差）来判断，统计误差最小的，为最适直线或曲线。而且在分析过程中和临床应用紧密结合，设定临床允许偏差。当线性评价的结果从统计上认为非线性，但是若采用线性方式处理病人结果，引入的误差不超过临床允许误差，可以接受作为线性处理，称为临床可接受线性。 选择合适的高、低浓度水平混合血清，按比例配制成系列浓度的样本。 核实测量范围：5到7个样本，每个样本重复测2次； 改良方法：7到9个样本，每个样本重复测2到3次； 建立测量范围：9到11个样本，每个样本重复测2到4次。 临床可报告范围： 可报告范围 = 定量检测限 + 分析测量范围（线性范围） + 最大稀释倍数 最大稀释度实验： 实验室可以从日常检测的样品中选择一到三个浓度较高的样品（接近线性范围上限）。 用厂商提供的稀释液（即日常检测用的稀释液）按照厂商提供的可稀释倍数来稀释。 然后检测稀释后的样品浓度，将检测值与预计值比较，以美国CLIA88能力验证计划的分析质量要求为标准判定结果是否可接受，如果在可接受范围内，证明验证了该稀释倍数是可靠的。 四、分析灵敏度性能验证 空白限（limit of blank，LoB）：在规定的可能性条件下，空白样品被观察到的最大检测结果。 检出限（limit of detection，LoD）：样本中分析物的最小量，可以在规定的可能性条件下予以检出，但可能还不能量化为一个确切的值。 定量检出限（limit of quantitation，LoQ）：在规定的可接受精密度和正确度条件下（总误差符合准确度要求，临床应用可接受），能定量测出样本中分析物的最小量。 相互关系：LoB LoD ≤ LoQ α= 假阳性可能 β= 假阴性可能 总误差 检验目标 相 对 频 率 0 LoB LoD LoQ总误差 报告 α β 不能检出 能检出 能检出 可检测 LoB LoD LoQ LoB 验证方案： 依据NCCLS EP17-A《检出限和定量检出限确定方案－批准指南》： ① 准备四份浓度等于或接近声明的LoD的样本，用参考方法检测以确认是否在LoD附近 ② 用测试方法，检测上述样本，每个样本重复测定5次，获得20个结果 ③ 计数超过厂家声明空白限（LoB）的检测结果数，如果计数结果≤3个，则验证了厂家声明 注：样本可以用Mastercheck Level 1 或者校准点B 或其它材料进行稀释获得 LoD 验证方案： 依据NCCLS EP17-A《检出限和定量检出限确定方案－批准指南》： ① 准备四份浓度等于或接近声明的LoD的样本，用参考方法检测以确认是否在LoD附近 ② 用测试方法，检测上述样本，每个样本重复测定5次，获得20个结果 ③ 计数超过厂家声明空白限（LoB）的检测结果数，如果计数结果≤3个，则验证了厂家声明 LoQ 验证方案： 依据NCCLS EP17-A《检出限和定量检出限确定方案－批准指南》： 准备一份浓度等于或者接近LoQ的样本，用参考方法或已经确认的方法检测该样本，记录靶值 ① 用测试方法测定上述浓度接近LoQ的样本，一个批次，重复检测25次，记录检测结果 ② 确定可允许总误差（TEA）：总误差＝不精密度×2＋偏倚（注：1、偏倚可以从干扰测定中获得，如10％；2、不精密度和干扰可以从试剂说明书中关于性能说明的章节中获得） ③ 计算允许范围：允许范围 = A - (B×A) 到 A + (B×A) （A：样本的靶值；B：可允许总误差） ④ 该25个结果，其中≤3个结果落在可允许范围外，即验证了厂家声明的LoQ 检测低限（lower