色谱复习题答案整理.docVIP

一．名词解释 capacity fact：容量因子，也称分配容量或容量比，用k′表示。其定义为：一定温度与压力下两相达平衡后，溶质在固定相和流动相中分配量（质量或摩尔数）之比. 分配系数：K,一定温度与压力下两相达平衡后，组分在固定相和流动相中浓度的比值; extra-column effect：柱外效应，即除柱内多种因素产生的色谱峰扩张外，其它产生峰扩张的因素之和：进样系统，系统连接管，检测器及其它柱外因素引起的峰扩张。 gradient elution：梯度洗脱，在HPLC分析中，控制流动相组成或洗脱强度随时间的改变而改变，以使极性差异较大的多个组分均能分离,同时谱峰间隔较均匀，分析时间尽量短。 HPSEC：高效体积排阻色谱法,即以多孔性填料为固定相，依据样品组分分子体积大小的差别进行分离的液相色谱方法。常用于肽和蛋白质的分子量分布测定及多步分离纯化程序中。其填料一般有硅胶基质和合成高聚物基质以及高交联多糖型凝胶三种。 ODS：十八烷基键合硅胶，又称C18. 典型的反相色谱柱，表面键和的基团为非极性羟基，适于分离弱极性，中等极性，较强极性及可电离的酸碱性有机物。 基线：在正常操作条件下，仅有流动相通过检测器系统时所产生的连续的响应信号，一般是一条直线; 峰面积：色谱曲线与基线间所包围的面积; 半峰宽：亦称半宽度,半峰宽度,指色谱峰高一半处的宽度σ：正态分布曲线x=±1时（拐点）的峰宽之半。正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小，分散程度小、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。(不保留组分流过色谱柱所需时间) 调整保留时间:tR’=tR-t0，指扣除死时间后的保留时间。 保留时间tR—进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。’=VR2’/ VR2’; 分离度: 相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。GC分析只限于气体和低沸点的稳定化合物，而这些物质只占有机物总数的20%；HPLC可以分析较高沸点、较高分子量的、稳定或不稳定化合物，这类物质占有机物总数的80%。 流动相的作用：GC采用的流动相为有限的几种“惰性”气体，只起运载作用，与组分之间基本没有作用；HPLC采用的流动相为液体或各种液体的混合，可供选择的条件自由度较大。它除了起运载作用外，还可与组分作用，并与固定相对组分的作用产生竞争，即流动相对分离的贡献很大，可通过流动相组成来控制和改进分离。 操作温度：GC需高温；HPLC常常在室温下进行。 10、UVD紫外,FLD荧光,RID示差折光,ELSD蒸发光散射-这些检测器哪些是通用型的检测器？哪些是选择性检测器？哪些可与梯度洗脱兼容？哪些不兼容？ UVD紫外: 由于不是所有化合物都有UV吸收，因此不是通用检测器;与梯度洗脱兼容 FLD荧光: 许多有机化合物，特别是芳香族化合物、被一定强度和波长的紫外光照射激发后，发射出较激发光波长要长的荧光。 ELSD蒸发光散射：适合于无紫外吸收、无电活性和不发荧光的且挥发性较小的样品组分的检测。 RID示差折光：是一种通用型检测器,只要被测组分与流动相的折光率有差别就可使用。与梯度洗脱不兼容,价格较高。 RID，ELSD是通用型检测器。UVD,FLD,是选择性检测器。 UVD, FLD, ELSD与梯度洗脱兼容。RID与梯度洗脱不兼容。 11、气相色谱分析中样品的衍生化处理的目的及作用? 待试样品在适当条件下与所选试剂作用使其转化成为满足色谱分析要求的衍生物后再进行色谱分析。目的：（1）增加试样的挥发性和稳定性，从而扩大气相色谱的应用范围（2）改善分离效果，改进组分吸咐特性。（3）帮助未知物定性，增加检测灵敏度和增加定量可靠性 12、请简述气相色谱法分析油脂的脂肪酸组成样品前处理过程? 取约3～5滴植物油样品于20ml试管中，加入0.5mol/L的NaOH甲醇溶液2ml，60℃水浴中加热至油珠完全溶解（约30min），冷却后加入25%BF3甲醇溶液2ml，60℃水浴酯化20min，冷却后加入2ml正已烷，振摇，加入2ml饱和NaCl溶液振摇，离心取上层有机相于一只干燥试管中并加入少量无水硫酸钠以除去微量的水，供分析使用。 13、什么样的反相柱不会发生“疏水塌陷”？ 对于硅胶基质填料上的反相键合相---内嵌极性基团的反相键合相，极性基团增加了表面水的浓度即改善与水的浸润性；如果硅胶表面未湿润，那么有效的色谱表面积会减少95%，被分析物的保留时间会显著降低，即“疏水塌陷”。保留时间与填料表面积及配体（内嵌极性基团）有关。注意：几乎所有的表面积都在孔内！ 14、流动相脱气的目的？有哪几种脱气方式？ 流动相脱气的目的 使色谱泵的输液准确输液量均匀准确，并且