生物材料(卫检)讲义.docVIP

生物材料检验：分析检验生物材料中化学物质及其代谢物的含量或因化学物质引起的的生物效应指标变化。 生物材料：是人体体液（如血液）、排泄物（如呼吸气、尿液）、毛发，指甲以及组织脏器等的总称。 生物标志物：指生物系统接触外源性物质后出现的一种变化。分为三类：接触性生物标志物、效应性生物标志物，敏感性生物标志物。 生物接触限值（BEL）：大体相当于健康人吸入接触最高允许浓度的毒物时生物材料中被测物的水平。 尿液可分为全日尿，晨尿，定时尿和随时尿。 生物半减期：指进入生物体内的化学物质的里量通过各种途径消除一半所需要的时间，又代谢半减期。 一、检验方法的一般要求： 1.方法的一般要求 1）灵敏度选择符合生物监测的基本要求 2）操作简便 3）试剂易得、价廉 4）效率高 5）符合国情，易推行、推广 2．选择和建立生物检测方法必须考虑的因素： 1）被测成分 ① 溶解性，稳定性 ②含量水平 高g/L水平 低ug/L 二 、方法研制准则的基本内容 1．取样、运输、保存的原则 1）取样： （1）容器工具材质不干扰测定 （2）取样的操作要防止污染 （3）取样时间根据半减期判断决定 （4）取样的体积 尿液=50ml 静脉血=5ml 末梢血500ul 2) 保存时间：一天，三天，一周，两周一般只要求两周 3）运输过程：保证分析物稳定，必要时要冷藏和冷冻运输 4）防腐剂（尿）和抗凝剂（血） 2.样品预处理原则 1）尿液浓度按比重校正 尿标准比重1.020，1.030及1.010的尿液应弃去 2）样品预处理的目的是消除干扰 （1）测定无机物时 ①用稀释液稀释后测定 ②混合酸消化 （2）测定有机物成分：先水解，再分离 （3）回收率=75% 3.制定分析方法的程序 1）分析条件选择、优化 2）确定检出限 （1）影响检出限的因素：试剂的纯度，仪器的工作状态，电源稳定性光源的温度变化、污染等不可控制的因素。 （2）检出限的确定 一般用统计法，一般用空白值的3倍标准差计算；色谱法用3倍噪音水平，检出限应小于0.3倍生物接触限值。 （3）检出限的表示方法 浓度或绝对量表示，用浓度表示时要说明方法取样体积。 3）精密度 ：同一个人用同一方法重复测定同一均匀样品测定结果的符合程度通常在线性范围内取高、中、低三个浓度水平分别重复测定3~5次。用RSD表示或用变异系数表示 复杂方法RSD=20 简单方法=10. 4)准确度 （1）分析高低浓度水平和国家级标准物质各一组，测定值应在标准值的不确定范围内。 （2）用接触表样品的加标回收率表示 回收率=75% 若105%表明存在明显的系统误差。（3）用标准方法或权威方法比较：①两个方法均值相对误差应小于10% ②t检验 在确定一个置信水平条件，两方法测定无明显差异 5）干扰试验 ：如果有干扰，要找出消除干扰的方法 6）样品的稳定性实验 ：时间：当天，3天，1周，2周 温度：室温，普通冰箱冷藏（4℃），冷冻保存（-8℃），低温冰箱（-20℃） 4.方法的验证 1）新方法的验证：必须是另一单位①研制方提供方法所有技术材料 ②验证内容：四项 线性范围，精密度，准确度，样品的稳定性。 2）引进国外标准方法或权威方法，引进方就是验证方。 5.现场应用 ①首先要观察检出率 ②观察检测结果与环境污染的符合程度 ③同时取非接触样品进行对照 三、确定生物监测指标的依据 （一）化学物质在体内的动力学过程 1.吸收 1）呼吸道吸收①气体物质通过肺泡壁及周围毛细血管吸收 ②固体物质， 溶解时吸收的前提 2）皮肤 ①有些有机物很容易被皮肤吸收 F=C/15 *(0.038-0.153p)exp(-0.016MN) F皮肤吸收量mg/㎝2/h C化学物质在水中的饱和度mg/ml P辛醇-水的分配系数 MN相对分子质量 ②许多农药易被皮肤吸收 如有机磷 2.体内分压和贮存 1）起始主要分布于血液中最终分布取决亲和力 2）血液侧得量是反映新近吸收量或机体组织的水平 3）血液中毒物或其他被测物并非均匀分布 4）一般脂溶性溶剂及卤代烃会分布在脂肪组织中，乳汁是检测有机氯农药最好的样品 5）体内储存毒物的形式大多为结合状态，测定尿液中的代谢物需要先水解 3. 生物转化 1）概念：外源性化合物在体内经过一系列化学变化并形成其衍生物以及分解产物的过程。 2）有关生物转化的讨论 ①是毒物发生质的变化 ②生物转化的数量关系，