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1、动物细胞的培养过程 2、有关概念 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。 2、有关概念 植物组织培养和动物细胞培养的比较 多莉羊的培育过程 二、单克隆抗体 B淋巴细胞与抗体 单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体? 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 小结 一种诱导细胞融合的新方法------- 3. 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞, 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( ) ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A. ②④ B.①③⑤ C. ①②③④ D.②③ C 教学目标巩固 * 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 动物细胞工程常用技术 胚胎移植技术 动物组织细胞间隙中含有一定量的蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 传代培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 (分解弹性纤维) 10代细胞 原代培养 50代细胞 细胞株 无限传代 细胞系 遗传物质未改变 遗传物质改变 一、动物细胞培养 讨论:细胞株与细胞系的特点 有何不同? 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 (1)请据图简述动物细胞的培养过程 (2)思考:动物细胞培养有哪些方面 的应用? 细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。 细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别: 细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。 3、动物细胞培养 的条件 (1)无菌无毒的环境 (2)营养 (3)温度和pH (4)气体环境 比较:植物的组织培养的条件 4. 动物细胞培养的应用 (1)大规模生产有重要价值的蛋白质生物制品。 (2)解决为大面积烧伤病人移植皮肤问题。 (利用贴壁生长和接触抑制原理) (3)检测有关物质毒性。 (4)培养正常或病变细胞,用于科研。 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 获得细胞或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株 培养目的 葡萄糖 动物血清 蔗糖 植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 细胞的全能性 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 思考: 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料? 1、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处? 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞? 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体? 主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有:1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强 成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体 1、谁是“多莉”的母亲? 2、“多莉羊”是雄还是雌? 3、是否符合孟德尔遗传? 问题 卵细胞 C母绵羊子宫 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 胚胎移植 早期胚胎 多莉羊 分娩 卵裂 融合后的卵细胞 细胞拆合技术 妊娠 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 一、动物细胞融合 2、过程: 1、概念: “2个或多个动物细胞”→“1”、“杂交单核细胞” 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 思考讨论: 为什么细胞融合过程 中使用的病毒需要 灭活? 1、什么是抗体?其本质是什么? 2、传统的抗体生产方法及缺陷是什么? 抗体是从何来的? B淋巴细胞产生抗体。 3、B淋巴细胞有什么特点? 抗体是机体受抗原刺激后产生的、 并能与该抗原发生特异性结合的 具有免疫功能的球蛋白。 1.B淋巴细胞受抗原刺
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