DNA生物传感器的发展资料讲解.pptVIP

Development of electrochemical DNA biosensors DNA生物传感器的发展 摘要部分 由于快速响应，高灵敏度，高选择性和实验方法简便易行，DNA生物传感器的应用吸引了广泛的注意。本文回顾了DNA生物传感器和被人们提及的、各种用于在制备传感器时克服它们在选择性和灵敏度方面局限性的方法。我们同时还讨论了他们的表现和前景。 1.背景和简介 生物传感器的种类按照其感受器中所采用的生命物质分类,可分为:微生物传感器、免疫传感器、 组织传感器、 细胞传感器、 酶传感器、 DNA传感器等。 生物传感器的特点 (1)采用固定化生物活性物质作催化剂,价值昂贵的试剂可以重复多次使用,节约成本简化过程 (2)专一性强 (3)分析速度快 (4)准确度高,一般相对误差可以达到 1%(5)操作系统比较简单,容易实现自动分析(6)有的生物传感器能够可靠地指示生物系统内的实时状况 DNA传感器的生物学基础 DNA碱基序列和它对应的碱基互补的链段之间的杂化，是所有由DNA决定的技术的基础。 一些传统检测技术： 聚合酶链式反应（PCR），基因测序技术 尽管那些传统技术给DNA诊断的实验室方法提供了最佳标准，但他们却不能满足用于临床上的即时检测。因此，研究者仍在努力寻找快速响应、高灵敏度、高选择性和实验操作简便的方法。这种方法能在固体装置和溶液中，快速监测生物识别和相互作用【生物体内生化反应】，并对其进行定量。 生物传感器的结构 传感器是由生物活性物质和检测器构成的一种装置。它包含三个部分：（1）感应【灵敏】部分（从生物体中获得的活性物质） （2）传感器或检测器：把检测到的信号转化成可识别的，量化输出（信号）信号处理器 （3）信号处理器：把转化来的信号通过一种便于理解的方式显示出来，提供给使用者 *在DNA生物传感器中，感应部分一般包含单链DNA分子。这种单链DNA分子可以和互补的另一条DNA单链发生DNA分子杂化。 *DNA生物传感器是一种近年来发展很快的新型传感器。 与传统的核酸检测方法相比，该方法更简单，灵敏，高选择性，操作方便且价格便宜。DNA传感器在研究基因表达，基因型分型，基因测试学，病原体区分，药物研发，基因测序和分子诊断方面有重大意义和价值。 2.工作原理 DNA生物传感器的设计是基于核酸分子杂化的动力学。电化学方法检测DNA分子杂化通常需要监测实时的响应（信号）。这是以互补配对识别为原则，且要在可控制的电极电势条件下。 修饰过的探针【电极】通常都浸入含有待测DNA的溶液中，用来检测目标DNA的碱基序列。当目标DNA含有与固定在电极表面充当修饰物的低核苷酸相匹配时，它们就会在电极表面形成杂化DNA双螺旋分子。 General design of DNA biosensor 3.重要影响因素 3.1在电极固体表面固定DNA探针 为了保证电极有好的灵敏度，探针的稳定性在制备生物传感器的过程中十分重要。同时，能否得到好的响应性和选择性取决于DNA分子杂化效率和杂质吸附的最小化。控制界面化学反应和覆盖效果是获得电极表面探针高稳定性必不可少的条件。 3.2 DNA电化学探针的设计和选择性 要提高DNA分子杂交过程，即DNA探针和与其互补的DNA片段结合的特异性，决定因素在于DNA电化学探针的设计。 有很多种不同结构的DNA探针： 单链cDNA, 发夹结构的DNA，肽核酸PNA和锁核酸LNA 这些固定在电极表面的DNA电化学探针会影响分子杂交效率。分子杂交效率在DNA生化传感器的灵敏度和特异性方面发挥重要作用。 由于结构特殊，发夹型DNA表现出特殊的性质： 单碱基错配的识别能力，固有的【固有特性】高灵敏度的信号传导机制，不需要分离杂化的和为杂化的探针就能检测出目标的杂化分子的能力） 因此，在检测特定基因时，发夹型DNA探针比传统DNA探针更受欢迎。 4.DNA分子杂交的电化学信号传导 一般通过特定氧化还原指示器电流信号的改变来检测DNA分子杂化反应。 1.直接电化学DNA检测方法 节省时间，节省开支 2.非直接电化学DNA检测方法 灵敏度较好；间接电化学检测手段能在原子级别对目标DNA的浓度产生响应。间接法需要能够允许与电极发生可逆电子交换的介质。已经报道了通过电化学媒介体间接氧化目标DNA的方法。 特定DNA氧化还原指示剂检测法 陈等人首次制备了一种新型的2-nitroacridone 2-硝基吖啶酮[NAD]电化学指示剂，将其用于发夹型DNA探针，从而制备出一种检测CML中的BCR/ABL 融合基因的电化学传感器。这种传感器在检测PCR扩增样本时也能得到满意的结果。 用纳米材料进行电化学信号放大的DNA检测技术 Wang使用涂有二茂铁基己硫醇和链霉亲和