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河南农业科学 , , (): ,
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JournalofHenanA riculturalSciences
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猪 IFN 和 IRF3基因 实时荧光定量
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RT PCR检测 方法的建 立
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王 蕊 张 改平 乔松林 刘永 晖 蒋志政 万 博 鲍登克 王 爱萍
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郑 州 大学 生 物工 程 系 河 南 郑 州 河 南 省农业 科学院 农业 部 动物 免疫 学
1. 450001 2.
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重点 开放实 验 室 河 南 省 动物 免疫 学 重点 实 验 室 河 南 郑 州 450002
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摘要 为建立猪 IFN 及 IRF3基因 实时 荧光定 量 PCR检 测 方 法 依 据 GenBank 中 IFN 和
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IRF3基因的保 守序列 设计 并合成各自特异性 引物 并以 actin为 内参基因 采 用 SYBRGreen
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Ⅰ为染料 建 立 实时 荧光定量检测 方法 提 取猪肺 泡 巨噬细胞 总 RNA 经反 转 录得 cDNA 用特异
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性 引物经 PCR扩增得到 IFN 和 IRF3基因 将 其 克隆 至 MD 19T载体 经 测序 鉴定 后 得 重 组
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