基因治疗课件摘要.pptVIP

2、 基因转移的方法 基因转移是基因治疗的关键和基础，实施基因转移的途径主要有两类： 1）直接体内法(in vivo) ，即活体直接转移法，指将外源基因直接注入人体内有关组织器官，使其进入相应的细胞 2）间接体内法（ex vivo) ，即在体转移，指在体外将外源基因导入细胞，再将这种细胞回输到病人体内。 1、基因转移的物理方法 基因转移的物理方法包括： 裸DNA直接注射、微粒轰击、电穿孔、显微注射等 （1）裸DNA直接注射 （1）磷酸钙共沉淀法 （2）DEAE-葡聚糖转染法 （3）脂质体转染法 （4）纳米颗粒转移法 （2）DEAE-葡聚糖转染法 二乙胺乙基葡聚糖（diethyl-aminoethyl-dextran,DEAE-dextran)是一种高分子量的多聚阴离子试剂 能促进哺乳动物细胞捕获外源DNA 该方法可广泛用于转染病毒、病毒序列及其他DNA 适合于细胞瞬间表达检测及小量DNA的转染。 主要分为两类： 1）病毒介导的基因转移 逆转录病毒（RV）载体 腺病毒（Ad）载体 腺相关病毒（AAV）载体 单纯疱疹病毒（HSV）载体 多种形式的嵌合病毒载体 3、基因转移的生物学方法 2）非病毒载体介导的基因转移 配体/受体 人工染色体 基因治疗的靶细胞 造血干细胞 肝细胞 肌细胞 淋巴细胞 皮肤成