单基因肥胖等单基因病分子遗传学的研究.pdf

北京协和医学院博士论文 目录 中文摘要………………………………………………………………………………3 Abs仃act…………………………………………………………………………………………………………8 第一部分单基因肥胖的分子遗传学研究…………………………………………14 1．前言……………………………………………………………………………………………………………14 2．实验材料…………………………………………………．．……………………………．．16 3．实验方法…………………………………………………………………………………24 3．1样品采集……………………………………………………………………………24 3．2基因组DNA提取…………………………………………………………………24 3．3已知单基因肥胖致病基因的筛查………………………………………………．．25 3．4全基因组连锁分析连锁分析及CNV检测………………………………………27 3．5外显子组测序及家系内测序结果验证…………………………………………．．31 3．6突变同源性分析…………………………………………………………………．．34 4．实验结果…………………………………………………………………………………36 4．1家系临床表现……………………………………………………………………一36 4．2已知肥胖基因的筛查结果………………………………………………………．．38 4．3芯片扫描结果及微卫星标记连锁分析验证………………………………………41 4．4外显子组测序结果分析及验证…………………………………………………一45 5．讨论……………………………………………………………………………………………………………………52 5．1过度生长与肥胖…………………………………………………………………．．52 5．2外显子组测序及其在复杂疾病中的应用………………………………………．53 5．3EFCAB4B有可能是肥胖的致病基因……………………………………………．54 5．4瘦素与肥胖………………………………………………………………………．．55 5．5MC4R与肥胖………………………………………………………………………58 5．6常见变异对体重的影响…………………………………………………………．．59 6．／J、l右……………………………………………………………………………………………………………………61 7．参考文献…………………………………………………………………………………62 8．文献综述…………………………………………………………………………………65 第二部分三种遗传性皮肤病的分子遗传学研究…………………………………77 1．前言………………………………………………………………………………………………………………．．77 2．实验材料………………………………………………………………………………．…79 3．实验方法…………………………………………………………………………………,80 3．1外显子组测序……………………………………………………………………．．80 3．2外显子组测序结果验证…………………………………………………………．．81 3．3外显子组测序原始结果查看及测序……………………………………………．．81 3．4CNV分析及结果验证……………………………………………………………．83 4．实验结果…………………………………………………………………………………86 4．1外显子组测序结果………………………………………………………………一86 4．2测序结果分析及测序验证………………………………………………………．．87 4．3外显子组原始数据查看及测序验证……………………………………………．．88 4．4CNV分析及结果验证……………………………………………………………．89 5．讨论…………………………………………