新型亲核NO供体和合成及地性能地研究.pdf

摘要 针对影响此NO供体临床应用的主要问题：亲核NO载体(多胺)的细胞毒性和致癌性副产 物证硝胺的生成，本论文选择了具有良好生物相容性的氨基酸、壳聚糖和氨基葡萄糖改性产 物做为新的NO载体，制备出一系列的新的亲核NO供体。对合成工艺和合成产物的结构都 进行了详细的研究和讨论，并考察了它们的NO释放性能，为这类新型亲核NO供体药物的 实用化提供了重要的理论基础。本论文的主要研究结果包括以下五点： 1壳聚糖的制备和表征及溶液性质研究。详细的研究了壳聚糖的乙酰化和三种降解方法 (超声、盐酸和双氧水降解)对化学结构和晶体结构产生的影响。在壳聚糖的乙酰化过程中， 当酸酐，氨基的摩尔比为大于0．3时将导致壳聚糖分子量的降低。在乙酰化过程中出现三种不 同的晶体形态：当脱乙酰度从94％降低至48％，乙酰化壳聚糖的晶型转变是从“formIl” 的紧密排列的分子构象到“formI”的伸展的松散排列的分子构象；乙酰度高于750／,，原来 的松散的晶体机构转变为一种类似甲壳素的更加稳定的晶体结构。由于在分子链的断裂时发 生脱胺化反应，双氧水降解导致壳聚糖的乙酰度升高，而超声降解和盐酸降解对壳聚糖的化 学结构无明显的影响。对超声降解和盐酸降解，壳聚糖的结晶度随分子量减小而增加，而更 深入的双氧水降解导致结晶度的降低。 首次采用最大气泡压力法研究了稀溶液中壳聚耱的分子量、乙酰度和溶液离子强度对溶 液表面张力的影响。结果显示：在极稀溶液中(浓度O．01xlff2Kg·L．1)，表面张力随着浓度增 大而减小；高于此l临界浓度，对于高分子量壳聚糖或低离子强度溶液，其表面张力随着浓度 增大而显著的增加；乙酰度对表面张力的影响很小。表面张力的这种变化归因于溶液中壳聚 糖分于构象的转变导致的分子内和分子问相互作用力的变化(主要是范得华力、氢键、疏水 作用和静电作用)．阐述了表面张力，分子构象和分子间相互作用力三者之间的密切关系， 有助于我们对壳聚糖生物活性和作用机理的理解。 2不同分子量和乙酰度的壳聚糖，NO加成产物的合成及其NO释放性能研究。采用红外 (FTIR)、紫外(UV)对它们的结构进行了表征．结果表明在壳聚糖的Nil基团上形成了 【N(O)NO】_基团。采用Griess试剂法对分子量和乙酰度对壳聚糖／NO释放性能的影响进行了 研究。结果显示。NO的最大释放晕在乙酰度6．95％的范嗣内望现高斯分布，乙酰度DAm 50％时产物的NO释放茸最大。对于相同乙酰度的壳聚糖／NO加成产物，其最丈NO释放量 与壳聚糖的分子量成lE比。x射线衍射图(XRD)表明对于壳聚糖与NO的非均相反应，反 应程度释放性能受到壳聚糖结晶形态的显著影响。NO最大释放颦与低布拉格角 (20=8．6-11．1。)的衍射峰的强度和晶面间距d的变化相同。此位置的峰代表一种结构松散的含 水晶型，NO分子很容易的进入此晶体结构中，与壳聚糖分子发生反应。 3改性壳聚糖亲核一氧化氮供体的合成及性能研究．分别闱非极性基团(丙醛)、极性 基团(丁二酸酐)、多胺(二乙烯三胺)改性壳聚糖，与NO反应得到三种对应的改性壳聚 糖，一氧化氮供体。NO释放试验表明，二乙烯二胺改性壳聚糖NO产物的NO释放量最大为 1945nmoVmg，丙醛改性壳聚糖NO产物的释放量是1156nmol／mg，TZ酸酐改性壳聚糖 NO由于其高韧性的膜结构使其同NO反应程度低，释放晕是87 nmol／mg。此外，还分别使 用了甲基、乙基、溴乙基三种保护基团。对负载NO后的壳聚糖，亲核一氧化氮供体进行保 护。对其合成方法和产物结构进行了初步的研究。 4氨基酸改性壳聚糖及其No负载性能研究。采用两种氨基酸(甘氨酸和赖氨酸)对壳 聚糖进行改性，在壳聚糖的C6和C2位点分别合成出氨基酸改性产物，研究了它们的NO 释放性能。结果表明：c6位点甘氨酸改性壳聚糖N0亲核供体的释放量为427 nmol／mg大于 C2位点甘氨酸改性壳聚糖NO亲核供体的释放量310nmol／mg，但半衰期却明显小于c2位点 改性壳聚塘No亲核供体。c6位点甘氨酸改性壳聚糖No的释放量大于赖氨酸改性壳聚塘No 的释放量327nmol／mg，半衰期则是赖氨酸改性壳聚糖大于甘氨酸改性壳聚糖． 5乙基纤维素NO药物控释膜的制备和研究。采用新合成的戊二醛改性氨基葡萄糖NO 体，研究了乙