SMART技术构建衣藻细胞的酵母双杂交文库.pdfVIP

下载本文档

108
0
约2.87万字
约 6页
2016-05-12 发布于安徽
举报
版权申诉

SMART技术构建衣藻细胞的酵母双杂交文库.pdf

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

生物技术通报 · · BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 20 11 9 研究报告年第期 SMART 技术构建衣藻细胞的酵母双杂交文库孙银行潘俊敏 ( ， 100084 ) 清华大学生命科学学院细胞骨架与信号转导实验室北京 : 。， SMART 摘要衣藻是用来研究植物光合作用和动物纤毛常用的模式生物为了研究蛋白质之间的相互作用利用。 Trizol 技术构建了衣藻的酵母双杂交文库使用试剂提取鞭毛再生过程和光周期培养的细胞进入分裂前的衣藻细胞的总 RNA ， Oligotex mRNA ; SMART LD-PCR cDNA ， CHROMA SPIN TE-400 经过纯化得到应用技术和合成双链经过柱子去除短片 cDNA ;cDNA pGADT7-Rec Y187 。 3. 0 × 106 CFU ，段的和线性化载体共转化酵母构建酵母双杂交文库库容达到重组率为 70% ， 0. 6 kb 。，，插入片段平均长度为以上结果说明该文库质量较好能够通过筛选文库得到与目的蛋白互相作用的蛋白质为寻找蛋白质的作用伴侣打下基础。 : SMART 关键词鞭毛再生细胞周期衣藻酵母双杂交文库技术 Construction of a Yeast-Two-Hybrid Library of Chlamydomonas reinhardtii with SMART Technique Sun Yinhang Pan Junmin (Cytoskeleton and Signal Transduction Lab ，School of Lif e Science ，Tsinghua University ，Beij ing 100084 ) Abstract : A Yeast-Two-Hybrid library of the model organism Chlamydomonas reinhardtii was constructed． Total RNA was extrac- ted from cells undergoing flagellar assembly or prior to mitosis using Trizol reagent． Oligotex was used to purify mRNA． The first strand cDNA was synthesized by reverse transcription of mRNA with SMART technique ，and