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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期
2013 7
大肠杆菌 UDP-葡萄糖脱氢酶基因的克隆、
表达及酶活性测定
1 2 2 2 2 1 1
陈奕涵 钱悦 侯永泰 周庆玮 甘人宝 管世敏 荣绍丰
（1. 上海应用技术学院香料香精技术与工程学院，上海 201418 ；2. 上海昊海生物科技股份有限公司，上海 201613）
摘 要 ： UDP-葡萄糖脱氢酶 （UDP-GlcDH ）是透明质酸合成过程中关键的限速酶，可以将UDP-葡萄糖催化生成透明质酸
必需的前体物质UDP-葡萄糖醛酸。分别采用大肠杆菌BL21 （DE3 ）和YK537 的基因组DNA 为模板，通过PCR 获得BL21 （DE3 ）
和YK537 的UDP-GlcDH 基因 ，并采用分子生物学方法分别将两种菌株的 基因插入含有P 启动子的pBLMVL2 载体中，分
ugd ugd L
别获得重组质粒pBLBugd 和pBLYugd ，再分别转化于大肠杆菌BL2 1 （DE3 ）和YK537 中，获得4 株重组菌；采用升温诱导表达
UDP-GlcDH ，并测定不同重组菌株的UDP-GlcDH 的活性，探索出不同温度诱导条件下UDP-GlcDH 的表达量及活性差异。结果表明，
采用双阶段升温诱导方式并添加适量酵母粉可以显著提高重组菌表达UDP-GlcDH 的活性。
关键词 ： 透明质酸 UDP-葡萄糖脱氢酶 PL 启动子 基因测序 酶活
-
，
Gene Cloning Expression and Enzyme Activity Assay of UDP glucose
Dehydrogenase in Escherichia coli
1 2 2 2 2
Chen Yihan Qian Yue Hou Yongtai Zhou Qingwei Gan Renbao
Guan Shimin2 Rong Shaofeng1
（1. ， ， 20 14 18 ；2.
School of Perfume and Aroma Technology Shanghai Institute of Technology Shanghai Shanghai Haohai Biological
， 20 1613 ）
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