骨髓间充质干细胞条件培养基对INS-1细胞凋亡的影响.pdfVIP

Med J Chin PLA, Vol. 40, No. 5, May 1, 2015 　339 论　著 ·基础研究· 骨髓间充质干细胞条件培养基对INS- 1细胞凋亡的影响 赵坤，郝好杰，臧丽，杨国庆，李祥，韩为东，母义明 [摘要]　目的　探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BM S C- CM )对促炎因子诱导大鼠胰岛素瘤细胞(IN S - 1)凋亡 的影响及其作用机制。方法　培养大鼠骨髓间充质干细胞(BM SCs)至第3代，收集、浓缩其上清液，获得富含BM SCs α β β 分泌因子的条件培养基。用含促炎因子TN F- 、IL - 1 、IFN - γ的培养基处理IN S - 1细胞4 8h ，造成炎症损伤 细胞模 型，加入不同浓度的BM SC- CM继续培养12h ，所获细胞分为以下5组：正常对照组，促炎因子组，1 ×BM SC- CM组， 2 ×BM SC- CM组，4 ×BM SC- CM组。采用CCK-8法检测INS- 1细胞存活率，膜连蛋白V /碘化丙啶(A nnex in V /PI)检测细 胞凋亡率，二氯荧光素双醋酸盐(D CFH-DA )检测细胞内活性氧(ROS) 的生成量。结果　与正常对照组相比，促炎因子 组INS- 1细胞存活率下降至正常对照组的75.84 % ±1.53% ，细胞凋亡率增加(17.23% ±1.77%) ，细胞内ROS水平明显升高 (34.3% ±0.80%) ，差异均具有统计学意义(P 0.0 1) 。而BM SC-CM有效对抗了促炎因子导致的INS- 1细胞损伤，其作用呈 剂量依赖性，4 ×BM SC-CM组效果最佳，该组INS- 1细胞存活率较促炎因子组升高了11.86% ，达到87.7% ±2.08% ，细胞 凋亡率下降至8.67% ±1.59% ，ROS生成量减少至17. 1% ±2. 14 % ，差异均具有统计学意义(P 0.05) 。结论　BM SC- CM 可 抑制促炎因子诱导的INS- 1细胞凋亡，其作用机制可能与BMSC-CM 降低细胞内ROS水平有关。 [关键词]　间质干细胞；细胞凋亡；炎症；INS- 1细胞 [中图分类号]　R587. 1　　　　[文献标志码]　A　　　　[文章编号]　0577-7402 (20 15)05-0339-05 [D OI]　10. 11855/j.issn.0577-7402.20 15.05.0 1 Effect of bone marrow mesenchymal stem cells-conditioned medium on the apoptosis of INS-1 cells 1 2 1 1 2 2 1* ZHAO Kun , HAO Hao-jie , ZANG Li , YANG Guo-qing , LI Xiang , HAN Wei-dong , MU Yi-ming 1 2 Department of Endocrinology, Laboratory of Molecular Biology, Institute of Basic Medicine, General Hospital of PLA, Beijing 100853, China * Corresponding author, E-mail: muyiming@301 This work was supported by