利用TAIL-PCR克隆耐盐基因及分析.pdfVIP

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2016-05-12 发布于安徽
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利用TAIL-PCR克隆耐盐基因及分析.pdf

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生物技术通报 BIO TE CHN OLOG Y B ULLETIN 2010 11 TAIL PCR 1, 2 2 2 张伟涛程国军周俊初 1 2 ( , 4 10004; , 430070 ) : 通过大量筛选得到一株高耐盐的豇豆根瘤菌WM E7, 最高可耐 15 g / L N aC,l 利 T n5sacB 转座子对该菌株进行随机插入突变, 从突变子中筛选获得 30 个共生缺陷型突变株利 TA ILPCR ( herm a l asymm e ric in erlaced PCR ) 方法克隆了突变株 Tn5sacB侧翼序列, 通过 BLA ST 发现有 1 个突变株的插入失活基因与鼠伤寒沙门氏菌抗银的结合蛋白 SilE有 94% 同源性, 表明有关 N a+ 离子的抗性基因可能与 A g+ 离子的抗性基因有某种关系该基因在其它菌中也能抗其它金属离子 ( 铜锌钴铬) : 筛选耐盐根瘤菌 TA ILPCR 耐盐基因 Screening of Salttolerancerh izob ium Strains and Cloning and Analysis of Salttolerance Gene 1, 2 2 2 Zhang W ei ao Cheng Guo jun Zhou Jun chu 1 ( Institute of B iologicalEnviomentalScienceTechnology, CentralSouth University Off orestry Technology, Changsha 4 10004; 2NationalLaboratory of griculturalM icrobiology, H uazhong gricultural University, Wuhan 430070) Abstrac:t A h igh sa lo lerance rhizobium s ra in w as screened, w h ich can grow n on 15 g /L N aC l YM A m edium a mo s. U s ing T n5sacB inse r ion mu agenesis, 30 sal o le rancedefec ive mu an s w ere screened by sa lo lerance expe rmi en s. The DNA sequences of he con iguou s reg ion from he T n5 inser ion si e w ere de erm ined by herm al asymm e r ic in er laced PCR ( TA ILPCR ) . A new gene w as cloned and BLA ST analysis of he gene show ed a sequence smi ilar i y ( 94% ) o Salmonella typhimurium silver b ind ing pro e in S ilE