中间锦鸡儿种子特异性fad2基因克隆及其fad2-1A基因酵母表达载体的构建.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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中间锦鸡儿种子特异性fad2基因克隆及其fad2-1A基因酵母表达载体的构建.pdf

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生物技术通报年第期 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2008 2 中间锦鸡儿种子特异性fad2基因克隆及fad2-1A基因酵母表达载体的构建 1 2 1 1 林萍李春秀齐力旺张守攻 1 2 ( 中国林业科学研究院林业研究所,北京 ;中国林业科学研究院森林环境与保护研究所,北京 ) 100091 100091 摘要: 脂肪酸脱氢酶( , ,也称为 )催化油酸生成亚油酸,是植物体内 Δ12 Δ12fattyaciddesaturaseΔ12FAD fad2 生成多不饱和脂肪酸的关键酶,种子中特异表达的fad2基因负责种子贮脂中多不饱和脂肪酸亚油酸的生成,决定种子油脂的成分和营养价值。采用和技术从中间锦鸡儿未成熟种子中克隆了种子特异表达的、 RT-PCR RACE fad2-1Afad2-1B 基因, 编码的前个氨基酸与的同源性高达 ,前者比后者多编码个氨基酸,全部氨基酸 fad2-1A 283 fad2-1B 98.9% 97 残基的同源性为。将克隆到真核表达载体中,构建了重组质粒 ,经检测、 70.71% fad2-1A pYES2 pYES2-fad2-1A PCR 质粒酶切、测序等检测,目的基因确实插入重组质粒,且方向正确,为进一步研究fad2基因的功能和表达调控机理奠定了基础。关键词: 中间锦鸡儿 fad2基因克隆真核表达载体 GeneCloningandEukaryoticExpressionVectorConstructionof Caraganaintermediafad2 1 2 1 1 LinPing LiChunxiu QiLiwang ZhangShougong 1 2 ( , , ; , ResearchInstituteofForestryChineseAcademyofForestryBeijing100091ResearchInstituteofForestEcology ,