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棉铃虫蛹发育与精氨酸激酶、转录因子AP.4的关系初探
专业:生物化学与分子生物学
硕士生:胡成虎
指导教师:徐卫华
摘要
棉铃虫(Helicoverpaarmigera)为蛹滞育昆虫,幼虫期经历长短光照可以发育成
subtractive
异表达的基因,试图回答昆虫个体的J下常发育(相对于滞育)是如何受到基因调节
的。
从SSH库中,随机挑选5个基因进行非滞育型和滞育型表达差异鉴定,以表达
差异最大的基因精氨酸激酶(argininekinase,ArgK)作为目标基因进行了初步的研究。
在脑中,非滞育型ArgK的蛋白活性要显著高于滞育型。给深度滞育蛹注射蜕皮激
素后能有效解除滞育,在解除过程中,血淋巴中ArgK蛋白活性上调。在蛹发育早
期,血淋巴中ArgK的蛋白活性也有类似趋势,非滞育型随着发育的过程ArgK蛋白
活性上调,而滞育型活性水平则处于相对低的状态。原核表达了有活性的重组ArgK,
深度滞育蛹在注射ArgK后能重新启动发育,这些结果表明ArgK对于棉铃虫的蛹期
发育可能具有较重要的作用。
4,AP.4)是一种能和DNA序列上得顺式作用元件
激活蛋白4(activatedprotein
E.box相结合的转录因子。本实验室根据滞育激素启动子上的E.box元件,从棉铃
期的发育表达,发现非滞育型AP.4的表达在核酸和蛋白水平都要高于滞育型,与
滞育激素基因表达趋势十分类似。体外翻译的AP.4蛋白能与滞育激素基因启动子
上的E.box元件特异结合,与内源的核蛋白表现出相似的结合特性。与绿色荧光蛋
白融合表达的AP.4蛋白特异定位于细胞核,且能有效激活DH.PBAN的启动子。这
些结果综合表明AP.4有可能通过调控滞育激素基因的表达实现对棉铃虫的蛹发育
的调节。
关键词:精氨酸激酶,激活蛋白4,滞育激素基因,蛹发育,棉铃虫
of
Regulation kinaseand
pupaldevelopment
byarginine
activated4in
protein
Helicoverpa
armigera
andmolecular
Major:Biochemistry
biology
Hu
Name:Cheng—Hu
Xu
Supervisor:Wei.Hua
AB
STRACT
87cloneswereisolated
and the
sequencedbyusing subtractive
suppression
hybridization 5
method,and weredetected
geneexpressions with2.foldhigher
in
expressmn brainthan
no
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