棉铃虫蛹发育和精氨酸激酶、转录因子AP-4的关系初探.pdfVIP

棉铃虫蛹发育和精氨酸激酶、转录因子AP-4的关系初探.pdf

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棉铃虫蛹发育与精氨酸激酶、转录因子AP.4的关系初探 专业:生物化学与分子生物学 硕士生:胡成虎 指导教师:徐卫华 摘要 棉铃虫(Helicoverpaarmigera)为蛹滞育昆虫,幼虫期经历长短光照可以发育成 subtractive 异表达的基因,试图回答昆虫个体的J下常发育(相对于滞育)是如何受到基因调节 的。 从SSH库中,随机挑选5个基因进行非滞育型和滞育型表达差异鉴定,以表达 差异最大的基因精氨酸激酶(argininekinase,ArgK)作为目标基因进行了初步的研究。 在脑中,非滞育型ArgK的蛋白活性要显著高于滞育型。给深度滞育蛹注射蜕皮激 素后能有效解除滞育,在解除过程中,血淋巴中ArgK蛋白活性上调。在蛹发育早 期,血淋巴中ArgK的蛋白活性也有类似趋势,非滞育型随着发育的过程ArgK蛋白 活性上调,而滞育型活性水平则处于相对低的状态。原核表达了有活性的重组ArgK, 深度滞育蛹在注射ArgK后能重新启动发育,这些结果表明ArgK对于棉铃虫的蛹期 发育可能具有较重要的作用。 4,AP.4)是一种能和DNA序列上得顺式作用元件 激活蛋白4(activatedprotein E.box相结合的转录因子。本实验室根据滞育激素启动子上的E.box元件,从棉铃 期的发育表达,发现非滞育型AP.4的表达在核酸和蛋白水平都要高于滞育型,与 滞育激素基因表达趋势十分类似。体外翻译的AP.4蛋白能与滞育激素基因启动子 上的E.box元件特异结合,与内源的核蛋白表现出相似的结合特性。与绿色荧光蛋 白融合表达的AP.4蛋白特异定位于细胞核,且能有效激活DH.PBAN的启动子。这 些结果综合表明AP.4有可能通过调控滞育激素基因的表达实现对棉铃虫的蛹发育 的调节。 关键词:精氨酸激酶,激活蛋白4,滞育激素基因,蛹发育,棉铃虫 of Regulation kinaseand pupaldevelopment byarginine activated4in protein Helicoverpa armigera andmolecular Major:Biochemistry biology Hu Name:Cheng—Hu Xu Supervisor:Wei.Hua AB STRACT 87cloneswereisolated and the sequencedbyusing subtractive suppression hybridization 5 method,and weredetected geneexpressions with2.foldhigher in expressmn brainthan no

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