秀丽线虫细胞色素b5及其还原酶调控多不饱和脂肪酸的合成.pdfVIP

摘要 多不饱和脂肪酸(Polyunsaturatedfatty 重要的成分，机体多不饱和脂肪酸的平衡影响着生物体正常的生理功能。哺乳动物体内合 成多不饱和脂肪酸实际上是一个耗氧的过程，饱和脂肪酸在一系列酶诸如细胞色素b5、黄 下形成多不饱和脂肪酸。已有研究表明在小鼠、利什曼原虫和拟南芥中，特定的脂肪酸合 细胞色素b5、硬脂酰辅酶A去饱和酶以及其他的去饱和酶之间的相互关系还未曾报道。在 秀丽线虫多不饱和脂肪酸合成过程中NADH．细胞色素b5还原酶和细胞色素b5是以哪种形 在去饱和作用过程中是否需要NADH．细胞色素b5还原酶和细胞色素b5的共同参与来激活 并发挥功能? 本研究以秀丽线虫作为模式生物，通过分子生物学和遗传学方法探索属于P450酶系 超家族基因的NADH．细胞色素b5还原酶和细胞色素b5影响多不饱和脂肪酸合成的具体机 的基因，并将提取的脂肪酸采用气相色谱来检IIII肪酸成分的变化。利用薄层色谱．气相色 谱连用的方法检测秀丽线虫脂肪含量的变化。本研究还运用荧光实时定量PCR检测秀丽线 虫相关脂肪酸合成与分解关键基因的表达量及用基因过表达绿色荧光蛋白的荧光强度检 测蛋白表达水平。并利用外源添加所缺脂肪酸的方法来缓解其缺陷的表型。 在本研究中，寻找到NADH．