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药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 11, 46 (5) : 6056 12 ·605 ·
建泽泻法呢基焦磷酸合酶分子克隆、分布表达及生物信息学研究
*
巍, 吴启南, 巢建国, 席蓓莉, 李 琳, 申修源
(南京中医药大学药学院, 江苏 南京 2 10046)
摘要: 三萜类化合物是道地药材建泽泻中的主要药效成分, 在癌症治疗方面有很大的应用潜力。法呢基焦
磷酸合酶 (FPPS) 为三萜类化合物合成途径中的重要限速酶之一, 本文运用同源克隆和快速 cDNA 末端扩增
(RACE) 技术相结合的方法, 克隆了建泽泻FPPS 基因的全长cDNA (accession no. HQ724508), FPPS cDNA 全长
为1 531 bp, 含有 1 个 1 032 bp 的开放阅读框, 编码343 个氨基酸的蛋白, 包含5 个保守的 能域, 其中两个富
含天冬氨酸 (DDXXD) 。实时荧光定量PCR (QRT-PCR) 结果显示建泽泻FPPS 基因在各器官中均有表达, 10 月
至 12 月上旬相对表达量呈上升趋势, 后下降, 其中叶片表达量较高, 块茎、根、叶柄表达量相对较低。高效液
相 (HPLC) 分析结果表明不同生长期建泽泻主要 效成分23-乙酰泽泻醇 B 变化趋势与FPPS 基因表达量变化
一致, 初步证明FPPS 是泽泻醇类化合物合成途径中的重要调控位点。本研究为利用植物基因工程改善中药材品
质提供科学依据。
关键词: 建泽泻; 法呢基焦磷酸合酶; 分子克隆; 实时荧光定量PCR; 23-乙酰泽泻醇B
中图分类号: R931 文献标识码:A 文章编号: 05 13-4870 (20 11) 05-0605-08
Molecular cloning of farnesyl pyrophosphate synthase from Alisma orientale
(Sam.) Juzep. and its distribution pattern and bioinformatics analysis
*
GU Wei, WU Qi-nan , CHAO Jian-guo, XI Bei-li, LI Lin, SHEN Xiu-yuan
(College of Pharmacy, Nanj ing University of Chinese M edicine, Nanj ing 210046, China)
Abstract: Triterpenes, which have large application potential in the treatment of cancer, are the main active
components of genuine medicinal material Alisma orientale (Sam.) Juzep . Farnesyl pyrophosphate synthase
(FPPS) is one of the important rate-limiting enzymes in the synthetic pathway of triterpenes. In this study
the FPPS
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