第六章普通生物化学第四生物氧化.ppt

（二）生物氧化的特点 （三）生物氧化的类型 （四）生物氧化中的氧化反应类型 (五）生物氧化的部位 二、生物氧化中CO2的生成 (一）直接脱羧 （二）氧化脱羧 三、生物氧化中水的生成 2、呼吸链的种类 （二）呼吸链的主要组成成分 1、烟酰胺脱氢酶类 2、黄素脱氢酶类 3、铁硫蛋白类（Fe-S） 4、辅酶Q类 5、细胞色素类 （三）呼吸链中传递体的排列顺序 3、呼吸链中传递体的排列顺序的依据 ②利用呼吸链抑制剂测定顺序 ③体外重组呼吸链 四、氧化磷酸化作用—ATP的生成 （二）ATP的生成 1、底物水平磷酸化 2、电子传递体系磷酸化 3、氧化磷酸化的阻断作用 （1）电子传递抑制 （2）氧化磷酸化解偶联 （3）离子载体抑制 （4）氧化磷酸化抑制 4、线粒体外NAD(P)H的氧化磷酸化 （2）苹果酸/天冬氨酸穿梭 （3）植物细胞质NADH的转运 （4）异柠檬酸穿梭 （三）氧化磷酸化作用的机理 五、高能化合物与ATP的形成 与动物细胞不同，植物细胞线粒体内膜的内外两表面均有以FAD为辅基的NADH脱氢酶。因此，胞质中的NADH扩散到达内膜外表面时，即可被那里的NADH脱氢酶氧化，氢被FAD接受后即可进入电子传递链。这种转运方式，胞质NADH的一对电子也只能产生2个ATP。 NADPH的电子可通过两条途径进入电子传递链。 ①经转氢酶催化， NADPH将氢先转移给NAD+: 生成的NADH再依上述方式将电子传递给电子传递链。 ②通过异柠檬酸穿梭作用。通过该穿梭作用，胞质中的NADPH转变为线粒体基质中的NADH，在这种转运过程中电子耗能很少，故每个NADPH可产生3个ATP。 氧化磷酸化和电子传递是相偶联的，电子在传递链中是怎样促使ADP磷酸化的呢？这是一个十分复杂的问题。 有三种试图解释氧化磷酸化机制的假说，包括化学偶联假说，构象偶联假说和化学渗透假说。其中化学渗透假说得到广泛的支持。 这一假说认为电子传递和ATP生成的偶联是通过一系列连续的化学反应，形成一个高能共价中间物，这个中间物在电子传递中形成，随后又裂解将其能量供给ATP的合成。化学偶联假说在呼吸链中找不到实际例子，但可用来解释3-磷酸甘油醛脱氢酶催化的产能和贮能过程。 1.化学偶联假说 2.构象偶联假说 这种假说认为线粒体内膜的F1ATP酶或某种电子传递蛋白的分子构象会发生变化，形成一种高能状态的构象，这种高能状态构象中的能量可以提供给ADP和Pi合成ATP，同时又可逆地恢复到原来的低能状态构象。 在F1ATP酶的活性中心合成的ATP和活性中心的亲和力高而不易释放，而F1ATP酶构象改变恢复到原来的低能状态，降低了活性中心和ATP的亲和力而将其释放。 构象上活化的呼吸蛋白的存在至今还没有被证实。 今天得到广泛接受的是称之为化学渗透（偶联）（chemiosmotic coupling)的第三种模型。 这个模型提出电子传递的能量驱动一个主动运送系统，引起质子从线粒体基质向外流动。换句话说，质子被呼吸链从基质“泵”出。这个反应产生了质子的电化学梯度。线粒体内膜外侧的pH比内侧低，外侧的质子有流回内侧的热力学倾向，以便使膜两侧的pH相等。 要保持质子梯度一定要使用能量。当质子流回基质时，质子梯度中的渗透能被释放，某些放出的能量被用来驱动ATP的合成。 这个模型在60年代刚提出时遭到强烈反对，现在已累积了大量支持这个模型的证据。Peter Mitchell 因提出这个模型获1978年诺贝尔奖金。 3.化学渗透（偶联）假说 化学渗透假说可以解释如下事实： ●迄今没有发现任何一种介于电子传递和ATP形成之间的高 能中间物； ●进行氧化磷酸化的线粒体内膜必须是完整的封闭的结构； ●线粒体内膜对H+, OH-, K+, Cl-等离子都是不通透的； ●破坏H+离子浓度梯度的形成（用解偶联剂或离子载体抑制剂等）都破坏氧化磷酸化作用的进行； ●线粒体电子传递所形成的电子流能从线粒体内膜逐出H+离子。 化学渗透学说的中心内容是：认为线粒体内膜对质子具有不可自由透过的性质，在内膜中组成电子传递链的递氢体交替排列，在电子传递过程中伴随有质子从线粒体基质转运到内膜外侧，结果形成内膜内外的电化学势梯度(由质子浓度差产生的电位梯度)，其中蕴藏的能量驱动ADP和Pi在膜结合ATP酶作用下合成ATP。 电化学势梯度建立的过程如下图所示。线粒体内膜构成封闭的质子不能自由通过的屏障。参与电子和质子转移的传递体不对称地交替排列在内膜上，递氢体可在内膜往返移动于内外侧之间，将基质中的质子转移到胞质，同时将两个电子传给一个电子递体。代谢