蜡样芽孢杆菌检测.ppt

蜡样芽胞杆菌概述 一 形态与染色 营养要求不高，在普通培养基上可生长良好，最适宜温度为28~35℃。菌落较大，不透明，表面粗糙似毛玻璃状或蜡状，边缘常成扩展状。在普通肉汤上培养基呈浑浊生长，常形成菌膜或壁环，震摇易乳化。 三 流行病学 蜡样芽胞杆菌 实验原理：蜡样芽胞杆菌具有以下生化特性： 实验材料 实验步骤 1 样品的保存和送检 待检样品应保持在6℃以下运送并尽可能不使其冷冻。对可疑是该菌引起的食物中毒的病人，应取可疑食物或病患者的呕吐物、粪便，且立刻在3小时内送检。送达实验室后，应保存于4℃并尽快检验。 实验步骤 2：样品稀释及计数： 3 分离培养 计数后，从每个平板选取5个已计数的菌落分别接种于营养琼脂斜面做纯培养，30℃培养24h，进行形态观察和证实试验。 分类 需氧芽孢杆菌根据芽孢囊膨大与否及芽孢的形状，可将其分为3个群。第一群的芽孢不突出菌体，形成的芽孢为椭圆形或圆柱形；第二类的芽孢囊突出菌体，形成的芽孢为椭圆形；第三群的芽孢囊突出菌体形成的芽孢为球形。 蜡样芽胞杆菌属于第一群。该群内细菌，根据营养型细胞的宽度可以又分为两类，其中宽度≥0.9μm者称大细胞群，该群有蜡样芽胞杆菌、蕈状芽孢杆菌、紫云金芽孢杆菌、炭疽芽胞杆菌、巨大芽孢杆菌。这几种与蜡样芽胞杆菌形态上相似的4个菌种必须用微生物学和生化学试验进行鉴别。 4 证实试验 1 形态观察 本菌革兰染色阳性，呈短链或长链，芽孢位于菌体中央或偏端，不是菌体胀大。 实验结果 3 计数（表面涂布法） 求职应注意的礼仪 求职时最礼貌的修饰是淡妆 面试时最关键的神情是郑重 无论站还是坐，不能摇动和抖动 对话时目光不能游弋不定 要控制小动作 不要为掩饰紧张情绪而散淡 最优雅的礼仪修养是体现自然 以一种修养面对两种结果 必须首先学会面对的一种结果----被拒绝 仍然感谢这次机会，因为被拒绝是面试后的两种结果之一。 被拒绝是招聘单位对我们综合考虑的结果，因为我们最关心的是自己什么地方与用人要求不一致，而不仅仅是面试中的表现。 不要欺骗自己，说“我本来就不想去”等等。 认真考虑是否有必要再做努力。 必须学会欣然面对的一种结果----被接纳 以具体的形式感谢招聘单位的接纳，如邮件、短信 考虑怎样使自己的知识能力更适应工作需要 把走进工作岗位当作职业生涯的重要的第一步，认真思考如何为以后的发展开好头。 Thank you * * （第一次课） 本菌是革兰氏阳性杆菌，1.0~1.2μm×3~5μm,菌体两端钝圆，有鞭毛，无荚膜，多成短链状排列。 本菌生长6小时以后可以既可以形成芽孢，形成的芽孢小于菌体横径，位于中心或稍偏于一端。 二 培养特性 病原菌 条件致病菌 肠毒素 耐热 不耐热 食物中毒 人或动物 非肠道传染病 eg:结膜炎 呕吐型 污染食品：米饭 我国多见 腹泻型 污染食品：蛋白型食品及果汁 欧美等国多见 污染途径： 泥土和灰尘 昆虫 不洁用具 不卫生的食品从业人员 实验目的 1、掌握蜡样芽孢杆菌检验的主要步骤与方法。 2、了解蜡样芽孢杆菌菌落特点和掌握生化反应结果的判断方法。 不发酵甘露醇：在甘露醇-卵黄-多粘菌素（MYP）琼脂平板上生成微粉红色菌落。 产生卵磷脂酶：分解MYP琼脂中的卵磷脂，在菌落周围产生粉红色混浊环（沉淀环）。 产生酪蛋白酶：分解培养基中的酪蛋白，生成L-酪氨酸在菌落周围形成透明圈。 产生溶血素：使胰酪胨大豆羊血琼脂（TSSB）中的血细胞发生β溶血。 产生明胶酶：将明胶水解为多肽再水解为氨 基酸而使其由半固体转化为液态状。 触酶实验: 产生过氧化氢酶分解过氧化氢生成水和氧气。 动力和硝酸盐试验: 蜡样芽胞杆菌运动活泼,能还原硝酸盐为亚硝酸盐。 甘露醇-卵黄-多粘菌素（MYP）琼脂平板 营养琼脂培养基 L-酪氨酸营养琼脂培养基 胰酪胨大豆羊血琼脂(TSSB) 动力-硝酸盐生化鉴定管 木糖-明胶生化鉴定管 硝酸盐试剂(1%对氨基苯磺酸溶液, 0.2% α-萘胺溶 液) 3%的双氧水 革兰染液 检样 50g(mL)+450mL无菌磷酸盐缓冲稀释液 10-1~10-6稀释液 30°C , 24h 形态观察 菌数测定 选择性培养基 MYP 营养琼脂 30°C , 24h 证实试验 革兰染色 生长及菌落观察 鉴别试验 生化反应 肠毒素测定 报告 检验程序 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 9mL 9mL 9mL 9mL 9mL