百里醌抑制体外骨肉瘤细胞转移的实验研究.docVIP

百里醌抑制体外骨肉瘤细胞转移的实验研究 　　【摘要】 目的：探讨百里醌抑制体外骨肉瘤细胞转移的作用及其机制。方法：本研究应用不同浓度百里醌作用人骨肉瘤SaOS-2细胞后，观察百里醌对体外骨肉瘤SaOS-2细胞迁移和侵袭的作用；Western blotting检测骨肉瘤细胞中MMP-2和MMP-9表达的变化。结果：百里醌可呈浓度依赖性抑制体外人骨肉瘤骨肉瘤SaOS-2细胞迁移和侵袭，同时百里醌可下调骨肉瘤SaOS-2细胞中MMP-2和MMP-9的表达。结论：百里醌可抑制体外骨肉瘤细胞转移，该作用可能通过下调MMP-2和MMP-9的表达而实现。 中国论文网 /6/view-7251307.htm 　　【关键词】 骨肉瘤； 百里醌； 转移 　　【Abstract】 Objective：To investigate the anti-metastasis effect and its mechanism of thymoquinone on the osteosarcoma SaOS-2 cell line in vitro.Method：In the study，after application of different concentrations of thymoquinone in the role of human osteosarcoma SaOS-2 cells，the effects of thymoquinone on the migration and invasion of osteosarcoma SaOS-2 cells were examined by using wound assay and matrigel counting.Western blotting was used to detect the protein expression of MMP-2 and MMP-9 in SaOS-2 cells.Result：Thymoquinone significantly suppressed the migration and invasion of osteosarcoma SaOS-2 cells in a concentration depended manner.The expression of MMP-2 and MMP-9 were down-regulated in osteosarcoma SaOS-2 cells after treatment of thymoquinone.Conclusion：Thymoquinone exerts anti-metastatic activity in SaOS-2 cells in vitro，which may be achieved by down-regulating the expression of MMP-2 and MMP-9. 　　【Key words】 Osteosarcoma； Thymoquinone； Metastasis 　　First-authors address：The First Peoples Hospital of Yueyang，Yueyang 414000，China 　　doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.05.007 　　百里醌（Oridonin）是从唇形科（Labtea）香茶菜属（Rabdosia）植物中分离出的一种贝壳杉烯二萜类（ent-kaurene diterpenoid）天然有机化合物，目前研究结果表明，百里醌能够抑制如前列腺癌、宫颈癌、肝癌和肺癌等多种肿瘤细胞增殖，并对细胞转移有一定抑制作用[1-6]。但目前尚未有百里醌对骨肉瘤转移的抑制作用的研究报道，为此本研究将观察百里醌对体外人骨肉瘤细胞转移的作用，并初步探讨其可能机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 主要药品和试剂 胰酶、胎牛血清和RPMI-1640培养基购自美国Gibco公司；MMP-2、MMP-9和β-actin抗体购自美国Epitomics公司；Transwell小室购自美国Corning公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒和结晶紫染色试剂盒购自南京凯基生物技术有限公司；人工重组基底膜（matrigel）和百里醌购自美国Sigma公司，百里醌用含30%DMSO的灭菌三蒸水配成5 mmol/L母液，置-20 ℃保存，应用时加RPMI-1640培养基稀释成目标浓度（DMSO的终浓度 　　1.5 Western印迹检测细胞中MMP-2和MMP-9的表达 裂解细胞并分离细胞蛋白质，用Bradford法测量蛋白浓度后取等量蛋白质样品（20 μg/孔），常规8% SDS电泳，半干