微生物的营养概要.pptVIP

五、培养基配制过程 –1、称量 1.在天平上放上称量纸，并把天平归零。 2.用药勺取出培养基，按配方称量。 注意事项 – 称量结束 清理桌面和天平 清洗药勺，擦干放回原处 药品放回药品柜 五、培养基配制过程 –2、溶解 倾倒培养基时，小心不要沾到玻璃瓶或烧杯壁上。 若有必要，需要利用电炉加热帮助溶解。 煮溶后要补加足水份，不能把培养基煮焦，焦化的不能使用 五、培养基配制过程 –3、分装 分装过程中，注意不要使培养基沾在管（瓶）口上以免引起污染。 注意：装入试管中的量不宜超过试管高度的1/3，装入三角烧瓶中的量以烧瓶总体积的一半为限。 培养基分装完毕后，在试管口或三角瓶上塞好棉塞，以阻止外界微生物污染培养基，并保证有良好的通气性能。 五、培养基配制过程 –3、分装 调整分注器 刻度，按量分装 分装试管 盖上试管 五、培养基配制过程 – 6、摆斜面 灭菌的试管培养基冷却至50℃左右，将试管一端倾斜搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管长的一半为宜。 五、培养基配制过程 – 6、倒平板 按无菌要求，在火焰旁操作，取融化并冷却至不烫手的固化培养基（约50℃），倒入无菌培养皿中，倒量以铺满皿底为限，不超过培养皿高度的1/2。 （１）如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。 （２）将全部培养基放入36±1℃恒温箱培养过夜，如发现有菌生长，即弃去。 （３）用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基，培养24～48小时，如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则该批培养基即应弃去，不能使用。　　 五、培养基配制过程 –7、培养基质量检验 五、培养基配制过程 –培养基保存 （1）基础培养基不能超过两周 （2）生化试验培养基不宜超过一周 （3）选择性或鉴别性培养最好当天使用，倾注的平板培养基不宜超过3天。 培养基灭菌后，可根据需要进行接种和纯培养 接种至斜面 接种至平板 讨论 1、什么时候可以倒平板？ 2、倒平板时需要注意哪些要点？ 讨论 用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉刚刚 不烫手时，就可以进行倒平板了。 讨论 用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉刚刚 不烫手时，就可以进行倒平板了。 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染 培养基。 讨论 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的 培养基上滋生，因此最好不要用这个平板 培养微生物。 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止培养基中水分的蒸发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 回顾复习 一、微生物基本知识 1、微生物的定义：结构简单、微小、生物 2、微生物的分类：细菌、放线菌、酵母菌、 霉菌、病毒 二、微生物实验基本条件和设备 1、实验室的注意事项：实验安全、无菌操作 （环境的无菌、操作的无菌、器皿的无菌） 2、无菌室的消毒方法：紫外灯照射、甲醛熏 蒸、酒精擦拭等 回顾复习 3、玻璃器皿的洗涤、包扎、灭菌： （1）洗涤剂：洗洁精、铬酸洗液等 （2）包扎：锥形瓶、培养皿、移液管、试管 （3）灭菌：烘箱干燥灭菌、高压蒸汽灭菌 4、常用设备 （1）显微镜：酵母的形态观察 简单染色（美兰） （2）培养箱、烘箱、高压蒸汽灭菌锅…… 回顾复习 三、常用试剂的配制方法（第一学期） （1）液体配液体——稀释配制 （2）固体配液体——直接称量配制 今日内容 解决三个问题：是什么？——什么是培养基？ 为什么？——为何起培养作用？ 怎么做？——怎么配制培养基？ 一、培养基的概念和作用 1、为什么有“培养基”的诞生？ 历史背景： 一、培养基的概念和作用 2、什么是培养基？ 培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。 3、渗透压 当两种不同成分的溶液或不同浓度的溶液放在一起时，即引起扩散作用，直至成为均一溶液为止。如将两种溶液用羊皮纸或其他类似的半渗透膜隔开，则两种溶液因性质不同可由一方渗透到另一方，结果产生一种压力称为渗透压，这种现象称为渗透现象。渗透压的大小依溶液中溶质的分子数目而定，分子数目越多则压力越大（如细胞质壁分离现象）。在同一重量百分浓度的溶液中，具有小分子溶质较具有大分子溶质的渗透压要大，离子溶液较分子溶液的渗透压大，所以盐类溶液的渗透压大于糖类溶液的渗透压。 渗透压对微生物有很大影响，微生物的生活环境必须具有与其细胞大致相等的渗透压