第16章超敏反应及其检测1技术报告.ppt

假阳性： ①皮试液不纯，含有非特异性刺激物； ②患者皮肤反应过强，如患者皮肤划痕症阳性； ③操作者手法较重，注射量较大或浓度过高、注入少量空 气等。 假阴性： ①皮试液抗原性低或失效； ②患者皮肤反应性差如老年人，或疾病大发作后； ③皮试前使用过抗组胺药物或免疫抑制剂等。 (2)点刺试验(prick test)： 方法： 注意： ① 设置阳性及阴性对照。 ②抢救准备。 ③假性现象。 2．应用与评价 真实、客观，与其他检测相关性强。 预防原则：寻找变应原，避免接触。 (1)寻找变应原： (2)预防药物或疫苗过敏： (二)粘膜激发试验(provocation test) 是模拟自然途径，使变应原进人体内，引起一 次轻微的发作，用以确定变应原的试验。 注意：严格的对照；抢救措施。 1．支气管激发试验 (1)非特异性激发试验： 常用指标：第1s用力呼气量(FEV-1)和肺活量； 15～20min后复查FEV-1； 阳性： ①明显自觉症状，如胸部紧迫感和喘息等； ②肺部闻及哮鸣音； ③FEV-1下降20％以上。 目的： (2)变应原激发试验： (3)应用评价：特异性高，与患者的病史、症状和 过敏原吸附试验的相关性较强。 2．其他激发试验 (1)鼻黏膜激发试验： (2)食物和药物激发试验： (3)结膜激发试验： (三)血清IgE的检测 1．血清总IgE的测定 (1)ELISA：双抗体夹心法。 (2)放射免疫吸附试验(radioimmunosorbent test，RIST)； (3)化学发光法： 参考值：成人血清IgE水平在20~200IU／ml (1IU=2．4ng)。 意义：疾病。 注意：总IgE高不一定是超敏反应； 而过敏者总IgE也不一定升高。 2．特异性IgE测定 (specific IgE，sIgE) (1)放射性变应原吸附试验(radioallergosorbent test， RAST)： 1967年由Wide建立 原理：固相载体-变应原-sIgE-125I标记的抗人IgE (2)ELISA (3)CAP变应原检测系统(CAP system)： 瑞典Pharmacia公司推出 原理：荧光固相免疫检测系统。其载体为CAP。 单价变应原CAP， 多价变应原CAP。 （4）免疫芯片 意义：专一性检测变应原。 (5)吸入物变应原过筛试验(Phadiatop)： 原理： Sample CAP，变应原吸附，将空气中95％ 以上的气传变应原吸附到1个CAP上，患者 血清中只要有针对这些变应原其中之一的 sIgE，即可呈阳性反应。 用途：过筛试验。 (四)嗜酸粒细胞阳离子蛋白测定 (eosinophil cationic protein，ECP) 作用： 标本：肺泡灌洗液和空腹血清ECP 测定方法：①CAP system双抗体夹心法。 ②ELISA (五)嗜酸粒细胞涂片检查 标本：分泌物，排泄物。 (六)嗜碱粒细胞脱颗粒试验 原理： 方法： 外周血分离嗜碱粒细胞+变应原→ →染色 判定：与对照比较，嗜碱粒细胞数减少 30％以上时为阳 性。 评价；与RAST和皮肤试验的符合率较高，可用于 寻找过敏原及判断脱敏治疗的疗效。 第二节 Ⅱ型超敏反应 特点：抗体(主要为IgG或IgM类)，补体、吞噬细胞和 NK细胞，导致靶细胞损伤或破坏。 细胞溶解型或细胞毒性超敏反应。 一、发生机制 (一)抗原刺激 1．细胞膜固有抗原 ①血细胞表面同种异型抗原 ②异嗜性抗原 ③改变的自身抗原 2．外来抗原和半抗原 (二)抗体介导靶细胞损伤机制 1．激活补体裂解靶细胞 2．免疫调理和免疫黏附作用 3．ADCC效应 4．刺激或阻