第二章化学成分研究方法技术报告.pptVIP

研究准备： 品种鉴定（学名）、产地；文献工作； 目标成分的结构类型，确定提取、分离路线； 未知成分：系统预试验，活性跟踪； 有效成分提取方法 聚酰胺（poliamide）吸附属于氢键吸附，是一种用途十分广泛的分离方法，极性物质与非极性物质均可适用，但特别适合分离酚类、醌类、黄酮类化合物。 化合物在水溶剂中，聚酰胺对其的吸附规律： 1、形成氢键的集团数目越多，则能力越强 2、成键位置对吸附能力的影响-易生成分子内氢键者 ，在聚酰胺上的吸附力减弱 3、分子中芳香化程度高，则吸附性增加 聚酰胺与酚类、醌类形成氢键缔合的能力在水中最强，在含水醇中随着醇浓度的 增高而减弱，在高浓度醇或其它有机溶剂中则几乎不缔合。 各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力由弱至强顺序： ① 葡聚糖凝胶（Sephadex G） ② 羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20） ③ 丙烯酰胺凝胶（Bio-Gel P） ④ 琼脂糖凝胶（Sepharose Bio-Gel A） ⑤ 羧甲基交联葡聚糖凝胶（SP-Sephadex） ⑥ 苯胺乙基交联葡聚糖凝胶（QAe-Sephadex） 树脂洗脱液，极性大的洗脱能力弱，极性小的洗脱能力强，故大孔树脂在水中的吸附性强，实际工作中，常将欲分离的混合物水溶液通过大孔树脂吸附后，依次用水、浓度由低到高的含水醇洗脱，常用含水醇为乙醇 （一）物理鉴定 1、检查有无均匀一致的晶形 2、熔点测定法：纯净的化合物熔点敏锐。 （二）化学鉴定 1、TCL：需用三种溶剂展开系统证明均为一个斑点 2、PC：纸色谱 3、GC：适合于可以气化的样品。 4、HPLC：适合所有化合物。 GC和HPLC的优点突出，用量少、时间短、灵敏度高、准确度高。 分子不饱和度的计算 红外光谱 利用分子中价键的伸缩及弯曲振动在4000~625cm-1红外区域引起的吸收，而测得的吸收图谱。 包括特征频率区和指纹区 可用于鉴别羟基、氨基、双键、芳环等特征官能团以及芳环取代类型。 紫外-可见吸收光谱 由电子能级跃迁产生的吸收图谱，在200~700nm范围内 含有共轭双键、发色团及具有共轭体系的助色团分子的化合物具有紫外-可见吸收。 主要用来推断化合物的骨架类型。 核磁共振波谱（NMR） 核磁共振波谱是化合物分子在磁场中受到另一射频磁场的照射，当照射场的频率等于原子核在外磁场的回旋频率时，有磁距的原子核就会吸收一定的能量产生能级的跃迁，即发生核磁共振，以吸收峰的频率对吸收强度作图所得到的图谱 分配色谱 分配色谱是利用成分在固定相和流动相之间 的分配系数不同而达到分离。分为正相和反向色 谱。 正相色谱：流动相的极性小于固定相 反相色谱：固定相的极性小于流动相 反相常用的有ODS、C8色谱 TLC 薄层色谱在天然产物提取中的应用 指导提取工艺的选择 提取溶剂的选择 确定提取次数 萃取剂的选择 A 指导分离条件的选择 选择柱色谱条件 检查分离的效果 B TLC TLC 中药化学成分 1 2 3 第二章 中药化学成分的一般研究方法 有效成分提取分离的方法 有效成分化学结构研究方法 4 生物合成途径 结构研究是天然药化的重要研究内容。 天然化合物结构研究的难度较大。 结构确定的化合物，可进一步药效学、毒理学、全合成、半合成、结构修饰、改造、新药开发等工作。 第四节 结构研究方法 纯度鉴定 第四节 结构研究方法 结构研究的主要程序与方法 程序 初步推断 结构类型 方法 1.物理性质 2.文献调研 测定分子式 计算不饱和度 官能团、结构 片段、基本骨架 分子平面结构 分子立体结构 1.元素分析及MS 2.同位素丰度比 3.HR-MS 1.官能团定性定量分析（Ω） 2.波谱数据：UV,IR,MS,NMR 1.综合分析 2.文献、化学沟通 1.CD,ORD谱；X-ray 2. NOE,2D-NMR 3.人工合成 物理常数的测定： 固体（晶体）：熔点、比旋度； 液体：沸点、折光率及比旋度。 另外还可以根据TLC的结果大致判断化合物是属于哪种类型的化合物。 第四节 结构研究方法 确定分子式，计算不饱和度 a.元素定量分析配合分子量测定 b.同位素丰度比法 c.高分辨质谱（HR-MS）法 HR-MS还可以给出化合物的精确分子量。 d.质谱法（MS） 质谱给出的分子量的信息。再从氢核磁共振波谱和碳核磁共振波谱中可直接获得碳氢的个数，就可以得到氧的个数，用这种方法也能确定化合物的分子式。 第四节 结构研