第基因表达调控精要.ppt

1．阻遏蛋白的调控作用 并不是所有进入胞浆的mRNA分子都可以立即与核糖体结合，翻译成蛋白质。 有一些特定的翻译抑制蛋白可以结合到一些mRNA的5端，抑制翻译。 如铁蛋白（ferritin）mRNA分子的5‘端非编码区有一段约30个核苷酸的序列，称为铁反应元件（iron-response element），可折叠成一个茎-环结构（即发夹结构）。 铁反应元件可以结合一个铁结合调节蛋白，抑制mRNA的翻译。该蛋白与铁离子结合后则不能与mRNA的铁反应元件结合。 2．翻译起始因子的功能调控 eIF-2是蛋白质合成过程中重要的起始因子，有些物质可以影响eIF-2的活性，调节蛋白质合成的速度。 网状细胞（reticulocyte）可以大量合成血红蛋白，当亚铁血红素（heme）缺乏时，珠蛋白mRNA的转录不会受到影响（调控不是发生在转录水平），但其翻译受到抑制。 例：网状红细胞中血红素水平对eIF-2活性的影响： 血红素丰富时：血红素抑制HCR活性 缺乏血红素时：HCR激活 血红素控制的阻遏蛋白 （heme-controlled repressor, HCR） 完成翻译起始后： eIF-2B GTP GDP-eIF-2 eIF-2B eIF-2B GTP-eIF-2 GTP-eIF-2 eIF-2B GDP 起始翻译 GDP-eIF-2 eIF-2B GTP GDP GTP-eIF-2- eIF-2B P GDP-eIF-2- eIF-2B P GDP-eIF-2 HCR GDP-eIF-2- P 3． 5 AUG对翻译的调控作用 按蛋白质生物合成的模型，以真核mRNA为模板的翻译开始于最靠近其5端的第一个AUG。90％以上的真核mRNA符合第一AUG规律。 但在有些mRNA中，在起始密码子AUG的上游（5端）非编码区有一个或数个AUG，称为5AUG。 5AUG可以减少正常AUG启动翻译的作用，使翻译维持在较低的水平。5AUG多存在于原癌基因中，是控制原癌基因表达的重要调控因素。5AUG缺失是某些原癌基因翻译激活的原因。 4．mRNA 5‘端非编码区长度对翻译的影响 起始密码AUG上游非编码区的长度可以影响翻译水平。 第一个AUG密码子离5端帽子的位置太近，不容易被40S亚基识别。 第一个AUG密码子距5端帽子结构的距离在12个核苷酸以内时，有一半以上的核糖体40S亚基会滑过第一个AUG。 5端非编码区的长度在17至80核苷酸之间时，体外翻译效率与其长度成正比。 （二）mRNA稳定性调节 mRNA的稳定性差别很大。 mRNA 3端非编码区结构影响其稳定性。 许多不稳定mRNA的3端非编码区都含有一段富含A和U的序列，这是引起mRNA不稳定的原因。 组蛋白mRNA的3端非编码区有特殊的茎-环结构，其稳定性受DNA合成调节。在DNA合成时，其半衰期约1小时，没有DNA合成时，其半衰期只有12分钟左右。 原因可能是多余的组蛋白与结合于茎-环结构的RNA结合蛋白相互作用，促进mRNA的降解。 （三）小分子RNA对翻译水平的影响 lin-14 蛋白质是一种核蛋白，它调控生长发育的时间选择。 lin-4基因表达产生两个小分子RNA，一个长度为22个核苷酸，另一个在3端延长至40个核苷酸。 lin-4 RNA结合lin-14 mRNA 3 UTR中的特异顺序，如去掉这种顺序，mRNA就不会被阻抑。 Differences in miRNA Mode of Action miRNA和siRNA不同点： a. 根本区别是miRNA是内源性的，是生物体的固有因素；而siRNA是人工体外合成的，通过转染进入体内，是RNA干涉的中间产物； b. 结构上，miRNA是单链RNA，而siRNA是双链RNA； c. Dicer酶对二者的加工过程不同，miRNA是不对称加工，miRNA仅是剪切pre—miRNA的一个侧臂，其他部分降解；而siRNA对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂； d. 在作用位置上，而siRNA可作用于mRNA的任何部位； e. 在作用方式上，miRNA可抑制靶标基因的翻译，也可导致靶标基因降解，即在转录水平后和翻译水平起作用；而siRNA只能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控； f. miRNA主要在发育过程中起作用，调节内源基因表达，而siRNA不参与生物生长，是RNAi的产物，原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。 ? miRNA和siRNA相同点： a.二者的长度都约在22nt左右； ? b.二者都依赖Dicer酶的加工，是Dicer的产物； ? c.二者生成都需