动(植)物疫病防制高技术原理与方法要点分析.docVIP

动（植）物疫病防制高技术原理与方法 免疫胶体金技术的应用及展望 摘 要: 免疫胶体金技术是继三大标记技术( 荧光素、放射性同位素 和酶) 后发展起来的固相标记免疫测定技术。免疫胶体金标 记技术是以胶体金作为示踪标志物, 应用于抗原抗体反应 的一种新型免疫标记技术。近年来, 该技术在医学、动植 物检疫、食品安全监督等各领域得到了日益广泛的应用。从 胶体金技术的基本原理、制备方法、标记技术、应用现状 及其优点等方面作一简要综述, 并对该技术的发展前景作 了展望。 关键词: 免疫胶体金技术 应用 展望 Prospect and Application of Immune Colloidal Gold Technique Abstract： Immune colloidal gold technique is a solid immune diagnostic technique developed in the base of three label technique( Luciferin, radio active isotope and enzyme), and it is a new immune label technique applied to the detection of antibody and antigen.Lately, the technique is widely applied to the scopes, such as medical ,animal and plant quarantine and the surve illance of food safety.The article summarized the basic principle, producing method, label techn ique and advantage of immune colloidal gold technique and discussed the existent problems and the future developmental trend of the technology. Key words: Immune colloidal gold technique App lication Prospect 免疫胶体金技术( Immune collo idal go ld technique, ICG )是一种常见的标记技术, 它是以胶体金为标记物, 利用特异性抗原抗体反应, 在光镜电镜下对抗原或抗体物质进行定位、定性乃至定量研究的标记技术, 是继三大标记技术(荧光素、放射性同位素和酶)后发展起来的固相标记免疫测定技术。胶体金最早由法拉第发现于1857年, 他用还原法从氯金酸水溶液中制备胶体金, 并发现在其中加入少量电解质后, 可使胶体金由红色变为蓝色, 最终凝集成无色, 而加入明胶或其他大分子物质便可阻止这种变化, 他的重大发现奠定了胶体金制备和应用的科学基础。1971年Faulk和Tay lon[ 1 ] 首次用兔抗沙门氏菌抗血清与胶体金颗粒结合、制备成金标抗体检测细菌表面抗原的分布。1974年, Romano 等[ 2] 用胶体金标记抗球蛋白抗体, 建立间接免疫金染色法。此后, 胶体金作为一种新型免疫标记技术得到很快发展。1980年, G eoghegan[ 3] 应用免疫金技术检测B淋巴细胞表面抗原, 建立了光镜水平的免疫金技术( immunogold sta in ing ,IGS)。D anscher[ 4 ] 在此基础上改进并发展了用银显影液增强光镜金颗粒可见性的免疫金染色法( immunogoldsta in ing, IGSS)。Ho lgate[ 5] 又对上法加以改进, 将免疫金染色与银显影技术相结合, 建立免疫金银染色法( immunogo ld silver staining, IGSS)。近年来, 研究人员根据胶体金的物化性质进一步拓展了基于胶体金标记的生物检测技术及胶体金在其他生物学方面的应用。目前已广泛应用于被动凝集试验、光镜染色、免疫印迹、流式细胞术、液相免疫测定、斑点金免疫渗滤及免疫层析等, 其中在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immuno-chrom atographic assay, ICA )和快速免疫金渗滤法( Do-t immunogold filtration assay, DIGFA )。免疫胶体金技