【全程复习方略】高中生物选修三DNA重组技术的基本工具.分析报告.ppt

2.(2013·枣庄高二检测)现有一长度为1 000个碱基对(bp)的 DNA分子，用限制酶EcoRⅠ酶切后得到的DNA分子仍是1 000 bp， 用KpnⅠ单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子，用 EcoRⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA 分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是(　　) 【解题关键】解答本题的关键有两点： (1)会读图、析图，所给选项中有线形DNA、环状DNA。 (2)正确分析切割位点不同所得片段不同。 【解析】选D。从题干中“用限制酶EcoRⅠ酶切后得到的DNA分子仍是1 000 bp”，再结合选项中DNA分子的可能酶切图谱分析可知，此DNA分子是环状的，故A、B排除。同理，从“用KpnⅠ单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子”，又可推知图谱中应有两个KpnⅠ酶切位点，故选D。 【变式备选】(2014·天水高二检测)限制酶是一种核酸切割酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。如图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的识别序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列是什么(　　) A.BamHⅠ和EcoRⅠ　末端互补序列为AATT- B.BamHⅠ和HindⅢ　末端互补序列为GATC- C.EcoRⅠ和HindⅢ　末端互补序列为AATT- D.BamHⅠ和BglⅡ　末端互补序列为GATC- 【解析】选D。A项中BamHⅠ酶切出的末端序列为-GATC-，EcoRⅠ酶切出的末端序列为-AATT-，两者不互补；B项HindⅢ酶切出的末端序列为-AGCT-，与BamHⅠ酶切出的末端序列不互补；同理可推，C项中也不互补，只有D项中才互补。 二、基因工程中常用的载体——质粒 1.特点：质粒是一种裸露的、小型、双链、环状DNA分子。 2.本质：质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型DNA分子，不是细胞器。 3.质粒作为载体所具备的条件： (1)能自我复制：能够在受体细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制。 (2)有切割位点：有一个至多个限制酶切割位点，供外源基因插入。 (3)具有标记基因：具有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 (4)无毒害作用：对受体细胞无毒害作用，否则受体细胞将受到损伤甚至死亡。 专题1　基因工程 1.1　DNA重组技术的基本工具 1.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 2.简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。 3.简述基因工程中载体需要具备的条件。 学习 目标 一、基因工程的诞生和发展 基因工程的基础理论和技术支持(连线)： 二、基因工程的概念 1.操作场所：_________。 2.操作技术：DNA重组和_______等技术。 3.操作结果：赋予生物新的_________，创造出更符合人们 需要的新的_________和生物产品。 4.操作水平：________水平。 生物体外 转基因 遗传特性 生物类型 DNA分子 三、DNA重组技术的三种工具 1.限制性核酸内切酶(也称“限制酶”)——“分子手术刀”： (1)来源：主要来自于_________。 (2)种类：约______种。 (3)特点：具有专一性。 ①识别双链DNA分子的某种_______________。 ②切割特定核苷酸序列中的特定位点。 (4)作用：断开两个核苷酸之间的___________。 (5)结果：产生_________或_______。 原核生物 4 000 特定核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 2.DNA连接酶——“分子缝合针”： (1)作用：将____________“缝合”起来，恢复被_______切 开的两个核苷酸之间的___________。 双链DNA片段 限制酶 磷酸二酯键 (2)种类： 既可以“缝合”双链DNA片段互 补的_________，又可以“缝合” 双链DNA片段的_______ T4噬菌体 T4DNA 连接酶 只能“缝合”具有_____________ 的双链DNA片段 _________ ________ DNA连接酶 特　点 来　源 种　类 E·coli 大肠杆菌 互补黏性末端 黏性末端 平末端 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”： 载体 ①质粒：是一种小型的双链环状 ________ ②_________的衍生物 ③动植物病毒等 ①能自我复制 ②具有一个至多个_______________ ③具有_________ ④对_________无害 种类 特点 作用结果：携带____________进入受体细胞 DNA分子 λ噬菌体 限制