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营养(nutrition):是指生物体从外部环境中摄取对其生命活动必需的能量和物质,以满足正常生长和繁殖所需要的一种最基本的生理功能。 营养物质(nutrient):具有营养功能的物质. 第一节 微生物的营养要求 营养物质的功能: 提供能量; 提供合成原料; 调节代谢活动进行; 提供适宜代谢环境; 6种营养要素: 碳源,氮源,能源,生长因子,无机盐和水。 1、碳源 碳源指一切能满足微生物生长繁殖所需碳元素的营养源。 1.1碳源的作用 构成机体中有机物分子的骨架 大多数微生物的能源 构成微生物代谢产物的分子骨架 1.2微生物的碳源 凡必需利用有机碳源的微生物,就是为数众多的异养微生物; 凡能以无机碳源作唯一或主要碳源的微生物,则是种类较少的自养微生物。 2、氮源 氮源指凡能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源。 2.1氮源的作用 构成微生物细胞物质或代谢产物中的氮素来源 一般不提供能源,只有少数例外 2.2微生物的氮源 包括蛋白质及其不同程度的降解产物(胨、肽、氨基酸等)、铵盐、硝酸盐、分子氮、嘌呤、嘧啶、脲、胺、酰胺、氰化物等。 速效氮源:很快被微生物利用的物质,有利于菌体生长,如硫铵、玉米浆等。用于发酵前期。 迟效氮源:微生物利用速度较慢的物质,有利于代谢物质形成,如花生饼粉、黄豆饼粉等。用于发酵后期。 氨基酸自养型微生物:一部分微生物不需要利用氨基酸作为氮源的,它们能把尿素、铵盐、硝酸盐甚至氮气等简单氮源自行合成所需要的一切氨基酸。 氨基酸异养型微生物:需要从外界吸收现成的氨基酸作为氮源的微生物。 3、无机盐 无机盐指微生物生长必需的金属元素,由硫酸盐、磷酸盐、氯化物等供给。 无机盐的生理功能: 4、生长因子 生长因子为一类对微生物正常代谢必不可少且不能用简单的碳源或氮源自行合成的微量有机物。 狭义的生长因子:一般仅指维生素。 广义的生长因子包括:维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶碱及其衍生物、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类、一些脂肪酸等。 生长因子的主要功能:提供微生物细胞重要化学物质、辅因子的组分和参与代谢。 5、水 水在细胞中的生理功能主要有: 微生物细胞的组成成分; 细胞营养物质和代谢产物的溶剂; 细胞中各种生化反应的良好介质; 维持微生物细胞的膨压; 稳定细胞内环境温度。 6.能源(energy source) 能源是能为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能 . 第三节 微生物的培养基 培养基是人工配制的,适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。 任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素:碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水。 1、选用和设计培养基的原则和方法 1.1培养基组分应适合微生物的营养特点(目的明确) 由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。 1.2营养物的浓度与比例应恰当(营养协调) 1.3 物理化学条件适宜 (1) pH 细菌: pH 6.5-7.5 放线菌: pH 7.5-8.5 酵母菌: pH 3.8-6.0 霉菌: pH 4.0-5.8 (1) pH 在微生物的生长和代谢过程中,由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累,培养基的初始pH值会发生改变,为了维持培养基pH值的相对恒定,通常采用下列两种方式: 内源调节:在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐;调节培养基的碳氮比。 外源调节:按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液 (2)水分活度 在一定的温度和压力条件下,溶液的蒸汽压力与同样条件下纯水蒸汽压力之比, 即:αw=Pw/P o w (3) 氧化还原电位 氧化还原电位又称氧化还原电势,是度量某氧化还原系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标,其单位是V(伏)或mV(毫伏)。 氧化还原电位: 好氧性微生物:+0.1伏以上时可正常生长,以+0.3~+0.4伏为宜; 厌氧性微生物:低于+0.1伏条件下生长; 兼性厌氧微生物:+0.1伏以上时进行好氧呼吸,+0.1伏以下时进行发酵。 2、培养基的类型及应用 2.1按成份不同划分 (1)天然培养基 一类利用动、植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基。 优点:取材方便、营养丰富、种类繁多、配制方便; 缺点:确切营养成分不明确、不稳定。 (2)合成培养基 合成培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。
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