高效液相色谱分离技术详解.pptx

高效液相色谱法HighPerformanceLiquidChromatography高效液相色谱仪器目录仪器的结构分离原理分离特点和局限性分类应用范围建立方法的步骤高效液相色谱仪器的结构高效液相色谱仪器的结构一般分为4个主要部分：高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。此外还配有辅助装置：如梯度洗脱、自动进样及数据处理等。工作过程如下：首先高压泵将贮液器中流动相溶剂经过进样器送入色谱柱，然后从控制器的出口流出。当注入欲分离的样品时，流经进样器贮液器的流动相将样品同时带入色谱柱进行分离，然后依先后顺序进入检测器，记录仪将检测器送出的信号记录下来，由此得到液相色谱图。1.高压输液系统：一般由储液罐、高压输液泵、过滤器、压力脉动阻力器等组成，其中高压输液泵是核心部件。高压泵应满足如下要求：流量恒定，无脉动，并有较大的调节范围。能抗溶剂的腐蚀，耐酸、耐碱。有较高的输送压力。一般分离，6.0×104Pa压力；高效分离，要求达到1.5~3.0×107Pa的压力或更高。④泵的死体积要小，便于迅速更换溶剂和进行梯度淋洗。在高效液相色谱中，常用的进样方式：高压阀进样：优点是能用于高压，适于大体积进样，重现性好；缺点是进样阀进样时需排掉一部分试样，不同的进样量需用不同的定量管，同时峰的扩展也比注射进样大。微量注射器进样：也可由微量注射器注入取样环少量样品，即采用较大体积取样环而进少量试样，进样量由