请叙述Na+-K+ATP酶工作原理极其作用。
3.简述细胞凋亡与细胞坏死的区别及细胞凋亡的检测方法。
细胞凋亡是一个主动的由基因决定的自动结束生命的过程,所以也常常被称为细胞编程死亡(programmed cell death, PCD)。凋亡细胞将被吞噬细胞吞噬。整个过程中,细胞质膜的整合性保持良好,死亡细胞的内容物不会逸散到胞外环境中去,因而不引发炎症反应。
二者的主要区别是,细胞凋亡过程中,细胞质膜反折,包裹断裂的染色质片段或细胞器,然后逐渐分离,形成众多的凋亡小体(apoptotic bodies),凋亡小体则为邻近的细胞所吞噬。整个过程中,细胞质膜的整合性保持良好,死亡细胞的内容物不会逸散到胞外环境中去,因而不引发炎症反应。相反,在细胞坏死时,细胞质膜发生渗漏,细胞内容物,包括膨大和破碎的细胞器以及染色质片段,释放到胞外,导致炎症反应(6分)
细胞凋亡的检测方法(4分)
形态学观测:染色法、透射和扫描电镜观察
DNA电泳:DNA片段就呈现出梯状条带
TUNEL测定法,即DNA断裂的原位末端标记法
彗星电泳法
流式细胞分析
9、叙述细胞凋亡和坏死的区别。
答:
细胞凋亡 细胞坏死 Apoptosis Necrosis
1) 细胞变圆,与周围细胞脱开 细胞外形不规则变化?(2分)
2) 核染色质凝聚 溶酶体破坏 (2分)
3) 细胞膜内陷 细胞膜破裂 (2分)
4) 细胞分为一个个小体 胞浆外溢 (2分)
5) 被周围细胞吞噬 引起周围炎症反应 (2分)
4.请叙述G-蛋白偶联受体介导的cAMP信号通路跨膜传递机制。(8分)
答:(1)胞外信号作用于细胞膜表面G-蛋白偶联的受体,G蛋白的α亚基结合ATP且α亚基、与βγ两个亚基分离。(2分)
(2)G蛋白在信号传导过程中起着分子开关的租用,它将受体与腺苷酸环化酶偶联起来,使胞外信号跨膜转化为胞内信号,即cAMP。(1.5分)
(3)腺苷酸环化酶活化后,胞内cAMP急剧增加,特异的活化cAMP依赖的蛋白激酶A。(1.5分)
(4)活化的蛋白激酶A催化亚基可使细胞内某些蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化,于是改变这些蛋白的活性。(1.5分)
(5)通过蛋白激酶A的活化,进而使下游的靶蛋白磷酸化,从而影响细胞的生理生化功能。(1.5分)
5.流动镶嵌模型认为膜中的脂类和蛋白质是流动的,有哪些实验可证明?(8分)
答: (1)荧光抗体免疫标记实验:用抗鼠细胞膜蛋白的荧光抗体(显绿色荧光)和抗人细胞膜蛋白的荧光抗体(显红色荧光)分别标记小鼠和人的细胞表面,然后用灭活的仙台病毒处理使两种细胞融合,10min后不同颜色的荧光在融合细胞表面开始扩散,40min后已分不清融合细胞表面绿色荧光或红色荧光区域。(3分)
(2)成帽和成斑现象 在某些细胞中,当荧光抗体标记时间继续延长,已均匀分布在细胞表面的标记荧光会重新排布,聚集在细胞表面的某些部位,即所谓成斑现象,或聚集在细胞的一端,即成帽现象。(2分)
(3)光脱色恢复技术:在某些细胞中,当荧光抗体标记时间继续延长,已均匀分布在细胞表面的标记荧光会重新分布,聚集在细胞表面的某些部位,即所谓成斑现象。聚集在细胞的一端,即成帽现象。成斑和成帽现象进一步显示了膜蛋白的流动性。(3分)
6.氧化磷酸化与光合磷酸化的比较(以表格式叙述为好)。(8分)
答:
? 氧化磷酸化 光合磷酸化 细胞器部位 线粒体内膜 类囊体膜 电子传递系统 呼吸链 PSⅠ、PSⅡ 电子供体 NADH或FADH2 H2O的光解 传递终受体 1/2O2 NADP+ 传递电子对 1对 1对 造成的H+质子浓度差 膜间隙(高)/基质(低) 类囊体腔(高)/基质(低) 电子跨膜次数 3次 2次 偶联因子 F0-F1ATP合酶 CF0-CF1ATP合酶 机制 化学渗透 化学渗透 偶闻因子定位取向 向内朝向基质 向外朝向基质 H+质子流向 向外流向膜间隙 向内流向类囊体腔 产生ATP所需的H+ 2个H+ 3个H+
7、何谓信号肽假说!简述其过程。
答1)分泌蛋白mRNA中有信号肽密码,信号肽引导游离核糖体与RER结合。(2分)
2)SRP识别信号肽并与内质网膜上的停泊蛋白(2分)
3)释放SRP,循环使用。(2分)
4)以环化够象存在的信号肽与易位子结合并使孔道打开,信号肽穿入内质网膜并引导肽链进入内质网腔,这是需GTP的耗能过程。(2分)
5)肽链进入内质网腔后,信号肽酶
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