Necl家族蛋白胞外区的表达纯化胞内区相互作用蛋白的筛查.pdfVIP

!!室垫塑垦兰堕堡主竺壅竺丝茎 白进行初步纯化，并用不同浓度的咪唑进行洗脱，最后选择50mmol／L的咪唑浓度作 为洗脱条件，获得了较高纯度的Necl4蛋白胞外区产物。 Necl家族蛋白通过胞内区与细胞内信号通路发生作用。为了进一步研究Necll 蛋白的作用机制，我们利用酵母双杂交系统筛选与Necll胞内区相互作用的蛋白。构 cDNA文库进行酵母双杂交筛选。酵母双杂交阳性克隆经测序后显示共存在9段不同 序列(存在重复克隆)。比对氨基酸序列得到5个可能的相互作用蛋白。并通过GST down实验验证了其中两个蛋白与Necll胞内区的相互作用。 pull 关键词：Necl，蛋白表达，昆虫表达系统，酵母双杂交筛选 2 北京协和医学院硕仁研究生论文 Abstract as knownCADMor are Nectin-like(Necl，