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血培养检验的操作规程
目录
1 目的 4
2 标本类型 5
3 标本的采集与运送 5
3.1 采集时间: 5
3.2 采集部位和采样次数: 5
3.3 采集量: 5
3.4 采集时的皮肤消毒: 5
3.5 标本运送: 6
4 血液、脑脊液、骨髓标本的操作 6
4.1 培养瓶的拒收标准 6
4.2 血培养瓶的处理 6
4.3 阳性培养瓶的操作 6
4.4 阴性培养瓶的操作 7
4.5 血培养阳性结果污染菌统计分析 7
4.6 影响因素 8
4.7 怀疑高传染性细菌感染 8
5 导管、导管头等标本的操作 8
5.1 标本采集 8
5.2 标本的接种 9
5.3 培养阳性 9
5.4 培养阴性 9
6 结果报告 9
6.1 危急值报告 9
6.2 初步报告 9
6.3 最终报告 9
6.4 结果解释 9
7 血培养常见病原菌 9
8 流程图 10
9 生物安全 10
10 参考文献 10
11 相关文件及表格 11
目的
正常人的循环系统、骨髓是无菌的,当人体局部感染向全身播散和出现全身感染时,血液等体液中可出现细菌,依程度不同称为菌血症或败血症。血培养是有效的细菌学检验方法,检测血培养标本中的病原菌,目前主要是培养需氧菌,需要时,要求能检出厌氧菌。为临床提供病原菌的抗菌药物敏感性等信息。
标本类型
血液、脑脊液、骨髓、导管头等无菌体液标本。
标本的采集与运送
采集时间:
当怀疑血流感染或脓毒血症时,应做常规血培养。血液标本的采集一般应于病人发热初期或发热后采集。应尽量选择在抗菌药物应用之前,对已用药物的患者,因病情不允许停药,应在下一次用药前采集。实际情况需要时,血培养应在短时间内立刻进行采集。间隔性抽血仅用于持续性菌血症的患者,如心内膜炎或其他血管内(如导管相关性)感染时。
采集部位和采样次数:
培养的阳性率与采样的频率和部位有一定的相关性,增加采样的次数和选择多部位连续采样,将会提高血液培养的阳性率,建议对血流感染可疑患者进行2-3次血培养,对成年患者不要只进行一次单一的血培养,血培养后2-5天不必重复进行。提倡双侧采血(同时采集左侧及右侧),双侧各采集一套。
采集量:
血液中细菌和真菌的检出率依赖于足够的血量,但用血量过多会引起假阳性。血液样本量与培养基量推荐比例为1:4-1:8,但血量增加时阳性率增加,最多每瓶增加到10ml。
合格血量为:成人每瓶6~10ml,婴幼儿1~4ml。
采集时的皮肤消毒:
培养瓶消毒程序:在静脉穿刺部位固定后,用70%酒精消毒血培养瓶上的橡胶塞,作用60s,用无菌纱布或无菌棉签清除橡胶塞表面残余酒精使其干燥。 检查瓶有无污染、破损,如果是,切勿使用。
皮肤消毒程序: 为了减少皮肤定植菌的污染,静脉穿刺部位必须消毒。可以使用70%酒精或1%-2%碘酊。70%酒精消毒静脉穿刺部位待30s以上,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上, 然后用1%-2%碘酊作用30s,再用70%酒精脱碘。碘过敏患者,用70%酒精消毒60s,待酒精挥发干燥后采血。采血人员不得在皮肤消毒之后接触静脉,除非戴有消毒手套。
推荐使用无菌注射器抽血,抽血后将血液转移到血培养瓶中,轻柔地倒置数次以防凝固。不可以将血液注入含有抗凝素的其他容器中,不可以使用连接采血管的持针器直接将血液抽入血培养瓶内。
标本运送:
采血后应立即送检,如不能立即送检,需置室温保存,12小时内送检,切勿冷藏或置于温箱。
血液、脑脊液、骨髓标本的操作
培养瓶的拒收标准
未正确标记的培养瓶及无标签无条形码的培养瓶。
破损、损坏及泄漏的培养瓶。
有凝块的培养瓶。
含有SPS以外的其他抗凝剂的培养瓶。
血培养瓶的处理
将血培养标本放入培养箱进行培养,培养时间为5d,期间每天观察培养瓶生长曲线变化。
血培养瓶接种后,应每天观察并记录两次生长情况,一旦发现阳性生长迹象,应立即做处理。
对待可疑阳性标本,应尽量在确认结果后60min内完成阳性结果确认及发出危急值报告。
阳性培养瓶的操作
若培养瓶显示有微生物生长,则用一次性无菌注射器抽取培养液至血平板、巧克力平板并涂片两张进行革兰染色。
抽取培养液的操作步骤:
75%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞,作用60s,将瓶口过火三次,使瓶口干燥。
用一次性注射器抽取适量培养液,不拨针头,直接滴加在血、巧平板及涂于玻片上。
注射器使用后不得再重复使用,不能将针头从注射器上取下、截断针头,回套针帽等,应将其完整地置于一次性锐器盒中。
将两块涂片进行革兰染色,置于油镜下镜检,观察有无细菌。如果涂片阳性,根据染色反应及细菌形态特征,将染色结果即刻通知临床值班医生,并在《危急值报告记录表》上登记。
如临床医生有需要立即做药敏实验,可从阳性培养瓶中取出一些培养液直接做药敏实验,在报告单上注明仅作为初步报告供临床医生参考(初步报告应包
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